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目的:观察双酚类化合物双酚A(Bisphenol A,BPA)及双酚S(Bisphenol S,BPS)对神经细胞系SK-N-SH细胞生长的影响,探讨Nrf2转录因子在BPA及BPS致细胞氧化应激及凋亡的作用,进一步阐明其细胞毒性的机制。方法:1、用不同浓度的BPS(0、50、100、150、200、250、300、350、400μmol/L)或BPA(0、50、100、150、200μmol/L)处理SK-N-SH细胞48 h后,采用MTT法检测细胞活力;用分光光度法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH)、总活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量;免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Nrf2的蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。2、用20μmol/L的Nrf2激活剂t-BHQ(特丁基对苯二酚)预处理SK-N-SH细胞30 min后再与BPS(100μmol/L)或BPA(100μmol/L)共孵育处理48 h,分光光度法测定ROS、SOD、MDA、GSH的表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测凋亡相关蛋白Bax、结果:1、BPA作用SK-N-SH细胞48 h的半数抑制浓度为164.54μmol/L;而BPS作用SK-N-SH细胞48 h的半数抑制浓度为345.43μmol/L。与对照组比较,100μmol/L的BPA处理组可引起SK-N-SH细胞的超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽还原酶(GSH)的水平下降,同时诱导总活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的水平上升。而用不同浓度的BPS处理SK-N-SH细胞时,随着染毒剂量的增加,ROS和MDA水平先上升后下降并且于200μmol/L水平时最高;同时SOD和GSH水平下降。凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2比值降低;Nrf2蛋白表达下降;细胞线粒体膜电位也呈下降趋势,且BPS染毒组随着染毒剂量增加趋势越明显。2、与BPS及BPA单独处理组比较,t-BHQ+BPS/BPA联合处理组SK-N-SH细胞的SOD、GSH的表达有所上调,MDA、ROS的表达也有所下调,凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2比值以及Nrf2蛋白表达量有所回升;线粒体膜电位有所升高。3、100μmol/L的BPS和100μmol/L的BPA单独处理组可引起细胞周期阻滞和细胞凋亡;而与BPS及BPA单独处理组比较,t-BHQ+BPS/BPA联合处理组的细胞周期阻滞和细胞凋亡情况有所缓解。BCL-2以及Nrf2的蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况。结论:1、双酚A和双酚S可降低SK-N-SH细胞的细胞活力,诱导细胞氧化应激,细胞周期阻滞和凋亡。2、Nrf2转录因子介导双酚A和双酚S对SK-N-SH细胞的损伤。