研究背景:血管新生（Angiogenesis）是肿瘤的一个基本特征。肿瘤细胞、巨噬细胞、成纤维细胞都对肿瘤血管新生发挥重要作用。最近报道认为CD4+,而不是CD8+,T细胞具有诱导EO771肿瘤血管正常化的作用。但我们的研究发现CD8+T细胞可以促进EO77肿瘤血管正常化,而CD4+T细胞往往起着相反的作用。我们的前期数据还显示:在不同肿瘤模型中,这两种T细胞对肿瘤血管的影响不尽相同,但这种差异现象的具体机制还不清楚。T细胞源于骨髓,并在胸腺中分化为CD4+和CD8+T细胞亚群,CD4+T细胞又可分化成Th1、Th2、Th17和调节性T细胞（Treg）等。其中,Treg是一类重要的免疫抑制性细胞,可以抑制CD4+与CD8+T细胞的功能。那么,肿瘤浸润Treg细胞是否影响CD4+与CD8+T细胞对肿瘤血管的作用呢?目的:研究Treg细胞与效应T细胞的相互作用及其对肿瘤血管的影响机制。方法:利用Foxp3-DTR/EGFP转基因小鼠在白喉毒素（DT）处理下可以选择性去除Treg细胞的特性,在Foxp3-DTR/EGFP小鼠上分别建立EO771原位乳腺癌模型和MCA38皮下结肠癌模型,然后腹腔注射DT,观察其对肿瘤生长的影响;通过流式细胞术分析免疫细胞的肿瘤浸润及其活化状态;通过免疫组织化学染色技术分析肿瘤血管灌注功能和肿瘤血管密度的变化;通过使用CD4抗体和CD8抗体来去除CD4+和CD8+T细胞,以确定Treg细胞通过影响哪种T细胞来重塑肿瘤血管及其微环境;通过使用IFNγ抗体,确定DT处理对肿瘤生长和血管的影响是否依赖于IFNγ;最后,通过实时荧光定量PCR技术,检测Treg细胞去除对细胞毒性因子相关基因表达的影响。结果:与野生型（WT）小鼠相比,DT处理只在Foxp3-DTR/EGFP小鼠上抑制EO771肿瘤生长,降低肿瘤浸润Treg的比例和增加肿瘤浸润CD4+与CD8+T细胞的比例。在Foxp3-DTR/EGFP小鼠的MCA38肿瘤模型,DT处理具有类似的上述作用。在Foxp3-DTR/EGFP小鼠的EO771和MCA38肿瘤模型,DT处理提高了 CD44在肿瘤浸润CD8+与CD4+T细胞上的表达,和增加了引流淋巴结效应记忆（CD8+CD44+CD62L-）和中心记忆（CD8+CD44+CD62L+）T细胞的比例。此外,在EO771和MCA38肿瘤模型中,DT处理还增加了肿瘤组织中巨噬细胞（TAM）、中性粒细胞（TAN）、单核细胞（Monocyte）和嗜酸性粒细胞（EOS）的比例。而且,低浓度的DT处理可以提高EO771和MCA38肿瘤血管灌注功能。实时荧光定量PCR结果显示,在EO771乳腺癌模型中,DT处理上调了穿孔素-颗粒酶杀伤途径相关基因的表达,如Ifng、Prf1、Gzma、Gzmb和Gzmf在MCA38结肠癌模型中,DT处理同时上调多种T细胞杀伤因子基因的表达,如Ifng、Gzma、Tnfa和Trail。在Foxp3-DTR/EGFP小鼠的MCA38肿瘤模型,在DT处理的基础上去除CD8+而不是CD4+,T细胞可逆转由DT处理引起的肿瘤生长抑制作用和肿瘤血管正常化。而且,IFNγ抗体处理可以逆转DT对CD4+和CD8+T细胞肿瘤浸润的促进作用及其诱导的肿瘤血管正常化。结论:降低肿瘤浸润Treg细胞的比例通过激活CD8+T细胞来诱导肿瘤血管正常化和抑制肿瘤生长,而且IFNγ在其中发挥主要作用。可见,肿瘤浸润CD8+T细胞具有促进肿瘤血管正常化的作用,而CD4+T细胞往往通过Treg细胞亚群发挥着相反的作用。