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本研究主要针对目前酶法制备的抗氧化肽活性较低的问题,探究了Maillard(美拉德)反应修饰对鲢鱼肽抗氧化活性的影响,以期为新型肽类抗氧化剂的开发提供理论基础。本论文的研究内容包括以下四个方面:1.研究了鲢鱼肽与葡萄糖Maillard反应系统在不同温度(60-90℃),pH8.0、0-12h内的反应动力学。结果表明,反应温度是影响鲢鱼肽与葡萄糖Maillard反应的重要因素。当反应温度较低时,Maillard反应较为缓慢,游离氨基的含量下降较慢,褐变强度、中间产物的紫外吸收和荧光强度值增加也较慢;而随着反应温度的升高,各个反应的速率均迅速增大。通过动力学分析发现:鲢鱼肽与葡萄糖Maillard反应过程中褐变强度、中间产物紫外吸收和荧光强度值的变化符合零级动力学,而游离氨基的变化符合一级动力学。游离氨基损失、产物的褐变强度A420nm、中间产物紫外吸收A294nm、荧光强度变化的活化能分别为89.13kJ/mol、148.7kJ/mol、136.1kJ/mol和138.5kJ/mol。这说明鲢鱼肽与葡萄糖Maillard反应初期阶段游离氨基较容易发生羰氨缩合,所需的活化能低;而褐色物质的生成主要在Maillard反应最终阶段,因此所需的活化能较高。2.深入研究了鲢鱼肽与葡萄糖反应体系在90℃、pH8.0条件下,糠氨酸和5-羟甲基糠醛(HMF)的含量随反应时间的变化,并测定了鲢鱼肽与葡萄糖Maillard反应产物(MRPs)的抗氧化活性,初步探讨了所含特征性中间产物与其抗氧化活性的关系。鲢鱼肽与葡萄糖MRPs的糠氨酸的含量先增大后减小,在8h时达到最高。HMF的含量随时间的延长而增大。反应6h的单独加热的葡萄糖中HMF含量约为相同条件下鲢鱼肽与葡萄糖系统中HMF含量的20%,即其焦糖化作用较低,因此可以认为在本研究中HMF的产生主要是Maillard反应作用的结果。MRPs的总抗氧化能力随反应时间的延长而增大。不同反应时间的鲢鱼肽与葡萄糖MRPs对亚油酸自氧化都有抑制作用,而反应8h的产物对亚油酸自氧化的抑制作用更强;反应8h后的MRPs对DPPH自由基的清除活性随时间变化不显著。另外,鲢鱼肽与葡萄糖Maillard反应过程中产生的糠氨酸和HMF之间没有显著的相关性,但HMF与总抗氧化力FRAP之间有显著的相关性(r=0.9495)。在Maillard反应中,还原糖对肽的降解和交联起促进作用。随着反应时间的延长,10005000Da和<1000Da的肽段降解程度逐渐增加,而>5000Da肽段含量增加,糖肽交联作用明显。3.研究了鲢鱼肽与葡萄糖在90℃、pH8.0条件下加热8h的MRPs经超滤分离及乙醇分级后水溶性和醇溶性组分的抗氧化活性,分析了其对DPPH自由基清除活性、金属离子螯合活性和总抗氧化能力,以及各组分的褐变强度、荧光强度等化学特性和,并初步解析其结构。(1)鲢鱼肽与葡萄糖MRPs中水溶性组分MRPsⅢ(>5kDa)对DPPH自由基清除活性、对金属离子的螯合活性和总抗氧化力最高;(2)水溶性组分中MRPsⅢ和MRPsⅡ(1kDa5kDa)的褐变程度较高,MRPsⅢ的荧光强度最高;(3)在红外谱图中,MRPs在860.66cm-1处有强烈的吸收峰,MRPsⅡ和MRPsⅢ在860.01cm-1和948.61cm-1处有强烈的吸收峰,说明还原糖可能连接到肽的骨架上,导致肽的结构发生部分变化;通过HPLC-MS分析可知,葡萄糖与鲢鱼肽链中的Lys、Leu、Ile和Ser的氨基发生结合,从而引起了MRPs结构和特征的变化。因此,鲢鱼肽与葡萄糖MRPs中起主要抗氧化作用的为水溶性物质,且其中相对高分子量的有色水溶性产物抗氧化活性较强。4.将具有较高抗氧化活性的MRPsⅡ(1kDa5kDa)应用于鲶鱼肉的冷藏中,研究了MRPsⅡ对脂质氧化的抑制效果。将0.5%鲢鱼肽、0.5%MRPs、0.5%MRPsⅡ和0.01%PG添加到鲶鱼肉中冷藏,在0-15d的贮藏时间里测定POV、TBARS值,探究不同处理对各测定指标的影响。结果表明,添加MRPsⅡ的鲶鱼肉的POV值与添加PG的POV值之间差异性不显著,即在抑制脂质氧化的初级阶段,MRPsⅡ与PG的活性相当;但对鲶鱼肉次级氧化产物的抑制作用(TBARS)次于PG。MRPsⅡ对冷藏鲶鱼肉具有显著的抑制脂质氧化的作用,主要是通过抑制脂质氧化的初级氧化产物、次级氧化产物的生成而发挥抗氧化作用。