黄紫堇生物碱成分的研究(Ⅰ)

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黄紫堇(Corydalis ochotensis Turcz)为双子叶植物纲罂粟科(Papaveraceae)紫堇属植物,生于荫的杂木林下、岩旁、溪畔或采伐迹地,国内主要分布于黑龙江、吉林省等地,全草入药主要用于疮毒、肿痛、痢疾、肺结核咯血等。国内对于该药材的研究报道较少,本文主要综述了紫堇属植物的的研究现状,并对黄紫堇的生物碱成分进行了初步探索,为今后该药材的开发利用提供前期基础。1、本文主要综述了紫堇属药材的研究概况及其生物碱成分的抗肿瘤研究资料。为今后进一步研究黄紫堇奠定基础。2、本文对黄紫堇植物进行了生药学研究,绘制了黄紫堇药材根、茎、叶、花的显微结构。理化检验结果表明,黄紫堇中含有生物碱、皂苷、甾体、糖及苷类、酚类物质等。黄紫堇生药学的研究为今后开发利用黄紫堇药材提供了理论支持。3、对黄紫堇中的生物碱成分进行了提取分离。即将黄紫堇全草粉碎后经0.5%硫酸溶液渗漉提取,渗漉液调节pH8-9后上AB-8大孔吸附树脂,采用碱洗和低浓度醇洗除杂纯化,经高浓度乙醇洗脱,回收乙醇液,而后经柱层析、重结晶、制备薄层色谱等方法分离得到了5个化合物,经13C-NMR,1H-NMR及质谱分析分别为胡萝卜苷(Ⅰ)、奥柯紫堇碱(Ⅱ)、原阿片碱(Ⅲ)、奥柯紫堇明碱(Ⅳ)及山缘草定碱(Ⅴ)。其中胡萝卜苷为黄紫堇植物中首次发现。4、本文建立了酸性染料比色法测定黄紫堇药材总生物碱的含量。通过波长扫描以及对于缓冲液pH条件,染料用量的筛选确定了具体的总生物碱含量测定方法。精密吸取一定量盐酸小檗碱对照品溶液及样品溶液于蒸发皿中蒸干,用6mL pH3.0的溴酚蓝柠檬酸-磷酸盐缓冲液研磨溶解残渣并转移至分液漏斗中,加入氯仿10mL振摇萃取5min后,静置1h分层,取下层氯仿溶液,加入0.5g无水硫酸钠静置脱水30min,滤过后在415nm处测定滤液的吸光度。经方法学验证可知:该方法简便、准确,可作为黄紫堇总生物碱的含量测定方法。黄紫堇总生物碱含量测定结果为0.616%。5、由于黄紫堇中主要含有生物碱成分,而文献报道生物碱类成分多具有抗肿瘤活性,因此本文进行了黄紫堇总生物碱的体外抗白血病和抗人结肠癌活性研究,由于实验中生物碱水溶性差,实验条件有限,因此对于生物碱的活性研究有所影响,初步研究发现黄紫堇中的生物碱对这两种细胞的体外抗肿瘤活性并不明显,对于黄紫堇总生物碱的抗肿瘤活性有待更深入的研究。
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