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目的:1、检测OLFML2A基因在肝癌细胞株中的表达;2、构建OLFML2A基因的RNAi慢病毒;3、检测OLFML2A RNAi慢病毒感染肝癌BEL-7404细胞后,细胞的增殖、细胞周期及凋亡的变化,初步明确OLFML2A基因对肝癌细胞生物学行为的影响。方法:1、构建OLFML2A基因RNAi慢病毒;2、采用荧光显微镜观察GFP绿色荧光来确定感染效率,通过RT-qPCR及Western-bolt等分析感染慢病毒后OLFML2A基因表达的变化;3、对数生长期的BEL-7404细胞株分为两组:慢病毒空载体组和慢病毒组,分别感染慢病毒空载体和慢病毒,Celigo法检测肝癌BEL-7404细胞的生长速度;MTT法检测细胞倍增速率;FACS法检测细胞增殖周期和凋亡的变化。结果:1、成功构建OLFML2A基因的RNAi慢病毒。2、人肝癌BEL-7404细胞株成功被OLFML2A基因RNAi慢病毒感染,显微镜下绿色荧光,其感染效率达80%;感染后OLFML2A基因mRNA水平显著下降(p=0.006,p<0.05),蛋白水平OLFML2A基因的表达明显减少(p<0.01),其敲减效率为68.6%。3、BEL-7404细胞感染慢病毒后:相比慢病毒空载体组,慢病毒组的BEL-7404细胞生长速率持续受到抑制(p=0.001,p<0.05);于细胞感染后第5天,慢病毒组G1期的细胞减少(p<0.05),处于S期的细胞数量无显著变化,G2/M期细胞显著增多(p<0.05);细胞感染后第3天,慢病毒组发生凋亡的细胞数量显著增加(p<0.05);MTT法检测细胞增殖:慢病毒组细胞增殖倍数明显减小(p<0.05),差异均有统计学意义。结论:OLFML2 A基因RNAi慢病毒显著抑制OLFML2A基因的表达,抑制人肝癌BEL-7404细胞增殖,促进其凋亡,影响其细胞周期。