自拟息风停煎对TS模型小鼠行为学和脑组织ACHE、NOS含量影响的实验研究

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目的:本课题旨在通过动物实验,观察息风停煎对多发性抽动症模型小鼠脑组织乙酰胆碱酯酶(ACHE)、一氧化氮合酶(NOS)含量及行为学的影响,探讨该方对治疗小儿多发性抽动症的作用机制,进而为息风停煎的抗抽动症疗效提供实验依据。  方法:实验分组:将70只小鼠适应性喂养1周后,淘汰个体体重差异较大的10只,按随机数字表法将余下的60只小鼠随机分为6组,分别为空白组(A),模型组(B),氟哌啶醇组(C),息风停煎高剂量组(D)、息风停煎中剂量组(E)、息风停煎低剂量组(F)。动物造模:对B、C、D、E和F组采用腹腔注射亚氨基二丙腈(IDPN)法来复制多发性抽动症小鼠模型,A组予等体积的生理盐水腹腔注射,造模7天。药物灌服:造模成功后, A、B组给予生理盐水灌胃,C组给予西药氟哌啶醇灌胃,D、E、F组分别给予息风停煎高剂量、中剂量、低剂量灌胃,灌服14天。实验指标的观察及检测:①刻板活动:每天下午3点进行刻板活动观察及评分;记录灌胃前1天,灌胃第1天,灌胃7天,灌胃第14天小鼠刻板行为。②脑组织ACHE及NOS含量:治疗14天后,将小鼠快速处死,剥离脑组织,用ELISA法检测脑组织乙酰胆碱酯酶(ACHE)及一氧化氮合酶(NOS)含量。所有数据釆用SPSS19.0分析软件进行统计分析,服从正态分布的计量资料以均数±标准差(X±S)表示,组间差异的比较采用方差分析,P<0.05表示差异有统计学意义。  结果:(1)治疗前后小鼠刻板行为与运动行为比较:中药高剂量组小鼠与西药组小鼠的运动行为、刻板行为评分都明显降低,与模型组相比统计学上有显著意义(P<0.05),中药高剂量组、西药组治疗实验小鼠,对实验小鼠运动行为都能起到良好改善作用,西药组与中药高剂量组疗效相当,中药中、低剂量组对小鼠运动、刻板行为评分略降低,与模型组比较无显著意义(P>0.05)。(2)脑组织ACHE测定:中药高剂量组、中剂量组及西药组都能够显著降低ACHE水平,跟模型组比较,差异均有显著意义(P<0.01)。(3)脑组织NOS测定:西药组、息风停煎剂高剂量组、中剂量组都能够降低脑组织NOS水平,与模型组相比差异均有显著意义(P<0.01)。中药高、中剂量组ACHE、NOS含量比较无明显差异(P﹥0.05),中药高、低剂量组相比,存在差异(P﹤0.05)。说明息风停煎剂存在一定量效关系。  结论:息风停煎剂对于IDPN诱发TS实验模型小鼠的刻板行为活动有明显抑用,改善TS模型小鼠的抽动及刻板运动症状;息风停中药煎剂可有效降低TS模型小鼠脑组织ACHE、NOS含量,息风停煎剂的治疗效果来源于降低脑组织ACHE、NOS含量有关;推测TS的发病机制和治疗机理与脑组织的ACHE、NOS含量有关,判断TS的疗效是由降低脑组织ACHE、NOS来使脑组织内ACH含量达到平衡状态发挥疗效作用。
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