【摘 要】
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黄芩苷(Baicalin)因抗氧化性和抗凋亡性强,具有清除自由基、抑制活性氧产生和凋亡基因表达,提高抗氧化酶的活性以及调控生殖激素等能力。由于卵母细胞脱离了母体环境,在体外培养过程中会受到氧化应激、凋亡等因素的影响,降低卵母细胞体外成熟率,并影响早期胚胎发育能力。本研究在小鼠卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度(0,20、40、60μmol/L)的黄芩苷,进行卵母细胞体外成熟培养检测成熟后第一极体排出
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区科技支疆项目“黑萨福克与多浪羊杂交改良与快速繁育技术研究与应用”的部分研究成果(项目编号:2016E02037),课题主持人:阿布力孜·吾斯曼 教授(新疆农业大学);
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黄芩苷(Baicalin)因抗氧化性和抗凋亡性强,具有清除自由基、抑制活性氧产生和凋亡基因表达,提高抗氧化酶的活性以及调控生殖激素等能力。由于卵母细胞脱离了母体环境,在体外培养过程中会受到氧化应激、凋亡等因素的影响,降低卵母细胞体外成熟率,并影响早期胚胎发育能力。本研究在小鼠卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度(0,20、40、60μmol/L)的黄芩苷,进行卵母细胞体外成熟培养检测成熟后第一极体排出率、胞质抗氧化水平、培养液抗氧化能力,并进行体外受精及后续胚胎的体外培养,以及对生发泡(Germinal vesicle,GV)期的卵母细胞进行玻璃化冷冻,对冷冻后的卵母细胞进行体外培养和体外受精,探究黄芩苷对卵母细胞体外成熟、受精及早期胚胎发育能力的影响,为进一步改善卵母细胞体外培养条件及抗氧化物选择提供参考。结果表明在卵母细胞体外成熟液中添加40和60μmol/L的Baicalin后与对照组相比卵母细胞第一极体排出率显著提高(P<0.05),培养液中SOD、GSH-Px活性及总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05),孕酮水平显著升高(P<0.05),卵母细胞胞质ROS水平显著降低,GSH含量显著提高(P<0.05),且浓度为40μmol/L时效果最佳。但对成熟后卵母细胞的受精率,卵裂率及囊胚率无显著性影响(P>0.05),对GV期卵母细胞玻璃化冷冻后进行体外成熟和体外受精试验并测定卵母细胞胞质中活性氧(ROS)含量,结果表明成熟液中添加不同浓度的(0,20、40、60μmol/L)黄芩苷后与未添加组相比,各浓度组卵母细胞第一极体排出率显著高于未添加组(P<0.05),卵母细胞胞质内活性氧含量显著降低(P<0.05),体外受精后的受精率,卵裂率、也显著高于未添加组(P<0.05),其中浓度为40μmol/L时效果最佳。结论:在小鼠卵母细胞体外成熟液中添加40μmol/L浓度的黄芩苷可以显著增强培养液中抗氧化酶活性及总抗氧化能力,显著提高体外成熟卵母细胞第一极体排出率以及GV期卵母细胞玻璃化冷冻后的第一极体排出率,受精率和卵裂率降低卵母细胞胞质中ROS水平。
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