牛病毒性腹泻病毒（Bovine Viral Diarrhea Virus,BVDV）为单股正链RNA病毒,属于黄病毒科、瘟病毒属成员。研究表明BVDV急性感染牛表现白细胞减少和免疫抑制。NLRP3炎性小体是宿主天然免疫系统的一个重要成员,参与了针对多种病原体的宿主防御反应,可招募和激活半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）,进而介导炎性细胞因子IL-1β/IL-18的分泌,诱发免疫反应。Morales-Aguilar A等研究发现BVDV感染牛单核巨噬细胞可通过触发Caspase-1依赖性途径介导IL-1β释放,且该途径的活化影响BVDV复制,表明NLRP3炎性小体可能参与BVDV的致病机制。为此,本研究以BVDV感染小鼠和牛腹腔巨噬细胞为研究模型,以NLRP3炎性小体为研究对象,深入探究BVDV感染诱发NLRP3炎性小体的活化规律及其对BVDV复制的影响,该研究为BVDV的防控提供理论依据。首先,为了确定BVDV急性感染与NLRP3炎性小体活化的相关性,选取4-6周龄雌性SPF级BALB/c小鼠进行CP型BVDV（NADL株）攻毒试验。结果显示,BVDV感染能够引起小鼠脾脏和十二指肠的病理变化,并在不同时间点的十二指肠、脾脏和血液中检测到病毒粒子,其中在感染第7 d时病毒载量达到峰值,证明BVDV感染小鼠模型成功。另外,研究发现BVDV感染早期（1 d、2 d、4 d）小鼠十二指肠中NLRP3、Caspase-1和IL-1βm RNA和蛋白表达水平均明显升高,1 d时变化最为显著。然而,在BVDV感染后期（7 d、10 d）NLRP3炎性小体相关蛋白的表达却明显降低,其中第7 d下降最为显著。以上研究表明,NLRP3炎性小体可能参与了BVDV致病过程。其次,为明确NLRP3炎性小体在BVDV感染小鼠中的作用,分别采用NLRP3炎性小体抑制剂MCC950和激动剂Nigericin处理,并通过NLRP3基因缺失小鼠进一步验证。结果显示,在BVDV感染1 d时,体内抑制和敲除NLRP3基因显著抑制了Caspase-1和IL-1β的蛋白表达,并且均可显著增加小鼠十二指肠、脾脏和血液中BVDV载量,表明NLRP3炎性小体在BVDV感染前期被活化,抑制其激活有利于病毒的复制。鉴于BVDV感染第7d时,NLRP3炎性小体活化被抑制。试验进一步采用Nigericin处理小鼠,发现Nigericin明显减少了十二指肠、脾脏和血液中BVDV的载量,表明NLRP3炎性小体在BVDV感染后期被抑制,其活化具有抗BVDV感染的作用。最后,为了进一步明确BVDV感染对牛腹腔巨噬细胞中NLRP3炎性小体活化的影响以及NLRP3炎性小体对BVDV复制的调控作用,分别收集BVDV不同感染复数及不同感染时间的细胞样本,IFA结果表明,4 MOI BVDV感染24 h时,NLRP3活化程度最为明显。为进一步探究NLRP3炎性小体对BVDV复制的影响,采用MCC950处理细胞,MCC950可以显著促进BVDV的复制,与小鼠体内试验结果相一致。综上所述,研究结果表明,BVDV感染早期激活了小鼠和牛腹腔巨噬细胞中NLRP3炎性小体,并依赖Caspase-1通路促进了IL-1β的表达。抑制NLRP3炎症小体的活化,可促进BVDV的复制。本研究为BVDV拮抗宿主先天性免疫的机制研究提供了理论依据。