【摘 要】
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随着抗生素在畜牧业和饲料工业中的不合理使用甚至滥用,继而出现了一系列弊端并日益突显。因此,寻找到一种能有效替代抗生素且无污染和副作用的绿色饲料添加剂已成为现阶段畜牧业的研究热点。微生态制剂具有调节动物消化道微生态环境,维持肠道菌群平衡;协助消化吸收,提高饲料利用率;增强动物免疫系统功能,提高抵抗疾病的能力,已成为抗生素替代品研究的热门课题。茶籽粕是油茶经过加工提炼后的主要副产物,因其自身含有许多生
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随着抗生素在畜牧业和饲料工业中的不合理使用甚至滥用,继而出现了一系列弊端并日益突显。因此,寻找到一种能有效替代抗生素且无污染和副作用的绿色饲料添加剂已成为现阶段畜牧业的研究热点。微生态制剂具有调节动物消化道微生态环境,维持肠道菌群平衡;协助消化吸收,提高饲料利用率;增强动物免疫系统功能,提高抵抗疾病的能力,已成为抗生素替代品研究的热门课题。茶籽粕是油茶经过加工提炼后的主要副产物,因其自身含有许多生物活性物质而将其加工成多种高附加值产品,有广泛的用途,可带来巨大的经济效益。但在实际应用过程中,由于开发程度远远不够而造成茶籽粕资源的极大浪费。因此,研究茶籽粕综合开发利用的方法意义重大。本研究利用茶籽粕粉改良细菌培养基配方,分离鸡肠道中的乳酸菌和芽孢杆菌,通过形态学、生理生化试验和分子生物学方法对分离到的菌株进行种属鉴定,再从耐酸试验、抑菌试验、温度耐受性试验、生长特性、产酸性能和药物敏感性等生物学特性方面筛选出用于禽类微生态制剂的优良乳酸菌和芽孢杆菌菌株。利用茶籽粕、豆粕和玉米粉等原料和筛选出的优良乳酸菌和芽孢杆菌,优化发酵培养基配方和发酵条件,并进行验证试验。主要研究结果如下:1)通过耐酸试验和抑菌试验共筛选出3株优良乳酸菌,分别为Lactobacillus gigeriorum(L03)、乳酸片球菌(L04)和卷曲乳杆菌(L09)。在p H 2.5的酸性条件下厌氧培养24 h后,活菌计数仍能达到10~4cfu/m L,证明3株菌有较强的耐酸能力。从抑菌试验结果表明,筛选出的3株乳酸菌对试验中3株常见致病菌表现出明显抑制效果。厌氧发酵24 h后,发酵上清液p H从5.8降到3.8左右,证明其具有良好的产酸性能。2)筛选获得1株用于茶籽粕发酵的优良芽孢杆菌,贝莱斯芽孢杆菌(Bv1)。结果表明,菌株Bv1有耐受高温的能力,对酸碱也有较好的耐受性能;测定生长曲线结果表明,Bv1在生长稳定期相比起另外两株菌活菌含量更高,对数生长期增长速度较快;药敏试验表明,菌株Bv1对常见的9种抗生素药物有较强的耐药性。3)以筛选到的乳酸菌和芽孢杆菌优良菌种为试验菌株,通过响应面试验获得茶籽粕发酵的最适培养基配方为:茶籽粕63%,豆粕21%,玉米粉6%,麸皮6%,膨润土4%;最优发酵条件为:温度37°C,发酵时间74 h,料水比0.7:1。在此优化方案下测得活菌数达到7.89×10~9cfu/g,和预测值基本吻合。
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