基于中枢敏化从Wnt/Ryk信号通路探讨电针对慢性神经病理性疼痛大鼠机械痛敏的作用及机制研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:onlymeley
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目的:1、比较联用督脉腧穴和无督脉腧穴两种取穴方法电针对慢性神经病理性疼痛大鼠机械痛敏的影响,探索慢性神经病理性疼痛电针治疗方法;2、观察电针对慢性神经病理性疼痛大鼠脊髓组织Wnt5b、Ryk、p-NR2B蛋白及Wnt5b、Ryk m RNA表达水平的影响,探讨电针治疗慢性神经病理性疼痛的作用机制。方法:24只雄性SD大鼠以随机数字表法等分为假手术组、模型组、电针Ⅰ组(联用督脉腧穴电针组)和电针Ⅱ组(无督脉腧穴电针组)。模型组、电针Ⅰ组及电针Ⅱ组大鼠以左侧坐骨神经慢性压迫性损伤制备慢性疼痛(慢性神经病理性疼痛)大鼠模型,假手术组只分离坐骨神经,不结扎损伤。电针Ⅰ组选取“至阳”“腰阳关”加患侧“环跳”“阳陵泉”穴,电针Ⅱ组选取患侧“环跳”“阳陵泉”穴。造模后第8天开始电针干预,至阳与腰阳关接电,环跳与阳陵泉接电,以2 Hz电针连续治疗7天,30 min/次,1次/d。以Von Frey纤维丝测痛仪测定各组大鼠造模前1天、电针干预前1天、电针干预7天后的左侧足底机械痛阈,即机械缩足反射阈值(PWMT)。电针干预7天并测完PWMT后,立即提取假手术组、模型组和电针Ⅰ组大鼠脊髓组织。以Western blot法检测脊髓组织Wnt5b、Ryk、p-NR2B蛋白表达水平,Real-time PCR法检测脊髓组织Wnt5b、Ryk m RNA表达水平。结果:1、造模前1天,各组大鼠PWT无差异(P=0.962336>0.05),提示各组大鼠PWMT基线一致;2、电针干预前1天,假手术组大鼠PWMT显著高于模型组和两电针组大鼠(P=3.0181E-7<0.01),提示造模成功,模型组、电针Ⅰ组、电针Ⅱ组间大鼠PWMT无差异(P>0.05),表明电针干预前,模型组及两电针组大鼠间PWMT基线一致;3、电针干预7天后,模型组大鼠PWMT显著低于假手术组(P=0.013223<0.05),电针Ⅰ组、电针Ⅱ组大鼠PWMT显著高于模型组(P=0.000003<0.01,P=0.000267<0.01),电针Ⅰ组大鼠PWMT显著高于电针Ⅱ组大鼠(P=0.001798<0.01);4、模型组大鼠脊髓组织Wnt5b、Ryk、p-NR2B蛋白表达水平明显高于假手术组(P=0.000096<0.01,P=3.56E-7<0.01,P=0.000161<0.01),电针Ⅰ组大鼠脊髓组织Wnt5b、Ryk、p-NR2B蛋白表达水平显著低于模型组(P=0.004887<0.01,P=0.000023<0.01,P=0.001737<0.01);5、模型组大鼠脊髓组织Wnt5b、Ryk m RNA表达水平明显高于假手术组(P=6.5369E-7<0.01,P=0.000187<0.01),电针Ⅰ组大鼠脊髓组织Wnt5b、Ryk m RNA表达水平显著低于模型组(P=0.000016<0.01,P=0.001911<0.01)。结论:1、联用督脉腧穴和无督脉腧穴两种电针取穴方法都可以改善慢性神经病理性疼痛大鼠机械性痛觉敏化症状;2、相比于无督脉腧穴电针方法,联用督脉腧穴电针可能可以更好的改善慢性神经病理性疼痛大鼠机械性痛觉敏化症状;3、电针可能通过抑制Wnt5b/Ryk信号通路功能及下调NR2B蛋白磷酸化水平来改善慢性神经病理性疼痛大鼠的机械性痛觉敏化症状。
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