目的本论文以桑树寄生药材为研究对象,进行包括性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、成分含量测定以及水分、总灰分、浸出物等指标进行研究,建立一套基于寄主影响的桑树寄生药材质量评价和桑树寄生药材质量控制的方法体系,制定出基于“双指标成分”检测和控制的桑树寄生质量标准草案,为从根本上实现桑树寄生药材质量“安全、稳定、有效、可控”,指导与规范临床用药,同时为推动进一步完善《中国药典》桑寄生药材质量标准,提供理论参考。方法1.样品采集和前处理:采集10个不同产地批次的桑树寄生样品及其寄主桑枝样品,采集柳树、肉桂2个寄主的柳树寄生、肉桂寄生及其寄主柳枝、桂枝为对照品,样品和对照品阴干。2.性状鉴别:按照《中国药典》要求,分别对桑树寄生药材茎枝、叶进行性状鉴别。3.显微鉴别:按照《中国药典》显微鉴别要求,对桑树寄生药材分别做显微切片和粉碎过筛,镜检,观察药材切片的显微特征和药材粉末的显微特征。4.理化鉴别:采用TLC和HPLC对桑树寄生药材中属于广寄生固有的成分槲皮苷进行定性和定量检测。5.桑树寄主的来源鉴别:采用1-脱氧野尻霉素（1-DNJ）为桑树寄生的特征性成分,对桑树寄生药材进行1-DNJ定性检测,并以非桑树寄主来源的柳树寄生和肉桂药材作对照,有效识别桑树寄主来源。6.常规检查:按照《中国药典》要求,对桑树寄生进行水分、灰分、浸出物等常规检查指标进行测定。7.强心苷检查:以地高辛为对照品,按《中国药典》要求对桑树寄生做强心苷检查。结果1.桑树寄生药材的性状特征为,茎枝呈圆柱形,长3～4 cm,直径0.2～1 cm;表面灰棕色或灰褐色,具细纵纹,并有多数细小突起的棕色或黄白色点状皮孔,嫩枝有的可见棕褐色茸毛;质坚硬,断面不整齐,皮部红棕色,木部色较浅。叶多卷曲,具短柄;叶片展平后呈卵形或椭圆形,长3～8 cm,宽2～5 cm;表面黄褐色或黄绿色,幼叶被黄色细茸毛,先端钝圆,基部圆形或宽楔形,全缘;革质。气微,味涩。桑树寄生药材的性状特征与柳树寄生和肉桂寄生药材的性状特征没有显著区别。2.桑树寄生药材显微特征（含茎枝横切片、粉末）鉴别,其中茎枝的显微特征为,表皮细胞有时残存,长方形或类椭圆形。木栓层为数列的扁平细胞,有的含棕色物。皮层窄,内侧有石细胞群。韧皮部甚窄,细胞小排列紧密,外侧纤维成群且断续排列成环,纤维壁较厚,在纤维群形成的环中可见单个或2～3个石细胞相聚。形成层明显,细胞小,4～8列,排列紧密。导管2～4个相聚或单列径向排列,木纤维众多,壁较厚。髓部细胞较大,排列疏松,可见石细胞。髓射线细胞2～3列,位于韧皮部的髓射线细胞中有石细胞,维管射线细胞1列。石细胞含草酸钙方晶或棕色物。粉末的显微特征为,黄棕色。石细胞类方形或类圆形,细胞壁多数未全面增厚。纤维多成束;导管多见螺纹导管、网纹导管,可见具缘纹孔导管。星状非腺毛多见。见单粒或复粒淀粉粒、长方形或正方形方晶以及类圆形碳酸钙晶体。桑树寄生药材的显微特征与柳树寄生和肉桂寄生药材的显微特征没有明显区别。3.桑树寄生药材槲皮苷TCL定性检测结果显示,以80%甲醇超声提取,以高效硅胶G板为薄层展开板,以乙酸丁酯-环己烷-甲酸-水（5:1.2:1.8:0.3,V/V/V/V）为展开剂,以3%三氯化铝乙醇溶液为显色剂,点样量为1μL的条件下展开,在与槲皮苷对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,且斑点显色清晰集中。柳树寄生和肉桂寄生在与槲皮苷对照品色谱相应的位置上也显示相同颜色斑点。4.桑树寄生药材特征性成分1-脱氧野尻霉素TCL定性检测结果显示,以正丁醇-甲醇-氨水（4:10:1.8,V/V/V）为展开剂,以氯-联甲苯胺溶液为显色剂,点样量为1μL的条件下展开,自然光条件下样品与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。柳树寄生、肉桂寄生不显示相同颜色的斑点。5.桑树寄生常规检查结果为,拟定桑树寄生药材水分不得过12.0%,总灰分不得过13.0%,酸不溶灰分不得过2.0%,醇溶性浸出物含量不得少于20.0%。6.桑树寄生药材强心苷的检测结果显示,10批次桑树寄生中均不含有强心苷。7.桑树寄生药材槲皮苷HPLC定量检测结果显示,10批次桑树寄生药材叶部位槲皮苷含量为2.80 mg/g-4.84 mg/g,平均含量为3.78 mg/g,茎枝部位槲皮苷含量为0.22 mg/g-0.42 mg/g,平均含量为0.34 mg/g。柳树寄生和肉桂寄生药材叶部位槲皮苷含量分别为3.20 mg/g和2.72 mg/g,茎枝部位槲皮苷含量分别为0.32 mg/g和0.23 mg/g,拟定桑树寄生槲皮苷含量不少于0.22 mg/g。结论1.本研究建立了包括性状鉴别、显微鉴别、槲皮苷和1-脱氧野尻霉素“双指标成分”的定性和定量检测以及水分、总灰分、浸出物等为主要指标的桑树寄生药材质量控制方法体系及药材标准,尽管桑树寄生药材性状特征、显微特征与非桑树寄主的柳树寄生和肉桂寄生没有显著差异,但基于1-脱氧野尻霉素的定性检测结果可以实现有效识别桑树寄生的桑树寄主来源。2.由于桑树寄生自然存在的槲皮素含量很低,本研究采用不同于《中国药典》桑寄生药材槲皮素定性检测进行理化鉴别的质控方法,桑树寄生药材采用槲皮苷定性和定量检测,结果表明槲皮苷的定性和定量检测可以作为桑树寄生药材质量控制方法。但槲皮苷的定量检测结果显示,作为“带叶茎枝”入药桑树寄生药材,由于茎枝和叶两个不同药材部位槲皮苷含量存在巨大差异,而临床用药的茎叶比又没有明确要求,因此,以茎枝中的槲皮苷最低含量作为槲皮苷含量指标的下限。3.槲皮苷为桑树寄生药材中属于药材原植物广寄生的固有功效成分,1-脱氧野尻霉素为桑树寄生药材中属于寄主桑树的特征性成分,采用“双指标成分”（即槲皮苷和1-脱氧野尻霉素双指标成分）和“两定性一定量”（即槲皮苷和1-脱氧野尻霉素的定性检测与槲皮苷定量检测）的检测方法,形成桑树寄生药材质量控制的核心方法,在能有效识别桑树寄主来源的同时,实现对桑树寄生药材的质量控制。4.现行《中国药典》桑寄生药材为多寄主来源,由于可能来源于含强心苷的寄主,因此《中国药典》桑寄生药材需要做不能含有强心苷成分的检查。而对10批次桑树寄生药材的强心苷检查发现,由于寄主桑树不含强心苷,桑树寄生药材也没有发现强心苷成分。因此,桑树寄生药材质量控制标准建议不需要做强心苷检查。