B.subtilis固态好氧发酵产纤维素酶特性及Ca2+诱导机制研究

来源 :重庆大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:biangei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
秸秆是自然界中广泛存在的可再生资源。但目前我国对秸秆的利用率低,资源严重浪费。由于微生物产生的纤维素酶在秸秆的高效降解中发挥重要作用,因此本课题首先开展了接种量、温度、通气量、料水比和基质粒径对B.subtilis固态发酵产酶和秸秆降解特性的影响研究,分析了其酶学特性。在此基础上,开展了外加Ca2+条件下B.subtilis产纤维素酶的特性研究,并通过高通量转录组测序在转录水平上对差异表达基因进行分析,探讨了Ca2+诱导B.subtilis纤维素酶合成的生物学机制。首先,论文对固态发酵产酶条件进行了优化。结果表明,在接种量30%、温度40°C、通气量0.6 L/min、料水比1:5和基质粒径0.84 mm条件下FPase、β-葡萄糖苷酶和CMCase酶活最高,分别为2.79 IU/g、4.23 IU/g、14.62 IU/g。酶学性质的分析结果表明,FPase、β-葡萄糖苷酶在50°C,CMCase在60°C条件下具有最大酶活力,在p H值为7时酶活力和酸碱稳定性最佳;Mg2+、Ca2+和Mn2+能激活酶促反应,而K+抑制了酶活力;酶对于0.5 M Na Cl具有较好的耐受性,但2 M Na Cl对酶促反应的抑制作用显著。通过对发酵基质进行表征分析,发现木质纤维素的组成和结构发生了改变,发酵后秸秆的结晶度较发酵前降低了30.17%。为了探索固态好氧发酵产酶的诱导特性,论文开展了Ca2+对B.subtilis固态好氧发酵产酶的影响研究。研究结果表明,在5 m M Ca2+处理条件下,FPase(4.20 IU/g)和CMCase(18.60 IU/g)酶活最高,是对照组的1.3-1.61倍。此条件对应的胞外蛋白含量达到13.77 mg/g,半纤维素、纤维素、木质素降解率为32.39%、41.23%、22.73%。同时,Ca2+诱导条件下纤维素酶合成相关基因q PCR检测结果表明,Ca2+处理能上调这些基因的表达倍数,而培养基中添加Ca2+螯合剂EGTA,则这些基因的表达倍数下调,实验结果进一步证实了Ca2+参与了B.subtilis纤维素酶合成的诱导作用。为了进一步揭示Ca2+诱导B.subtilis纤维素酶合成的机制,论文开展了转录组研究,共筛选到912个差异基因(342个上调表达基因和570个下调表达基因)。对与纤维素酶家族、碳水化合物代谢、转运蛋白有关的基因进行解析,结果表明,差异基因主要编码CAZy家族中GT、GH和PL家族的酶。与糖酵解过程有关的基因上调程度最为显著,推测糖酵解途径可能在代谢碳水化合物中发挥主要作用。ABC转运蛋白可能与纤维素酶的合成及其对纤维素的降解相关。实验结果最终表明,在Ca2+诱导条件下,碳水化合物代谢活性增强,葡萄糖及时被转化和利用,可能缓解了葡萄糖的终产物抑制效应,有利于细胞内纤维素酶的合成。此外,Ca2+上调了编码ABC转运蛋白基因的表达水平,加强了小分子糖类的转运活力,基于这些小分子糖类对纤维素酶合成的诱导效应,引起胞内纤维素酶相关基因表达上调,从而促进了B.subtilis纤维素酶的合成。
其他文献
空气源热泵是一种以空气作为热源,通过少量电能驱动压缩机运转,实现能量转移的供暖设备,对比锅炉等传统供暖设备,空气源热泵具有节能高效等多方面优势。空气源热泵是我国北方农村清洁供暖的重要设备。为减少化霜期水温下降幅度保证水温稳定,该地区空气源热泵均配备缓冲水箱。北方农村空气源热泵的实际使用情况表明空气源热泵配备缓冲水箱后进行供暖存在制热量及性能系数衰减的弊端。此外目前空气源热泵与缓冲水箱的匹配以及不同
电场耦合式电能传输(Electric-field Coupled Power Transfer,ECPT)技术是以高频电场作为媒介来实现电能的无线传输,该技术具有耦合极板形状易变、简易轻薄等特点,当ECPT系统处于工作状态时,周围环境受到的电磁辐射小,耦合极板之间及周围的金属导体产生涡流效应甚小。众多的优点让该技术越来越受到世界各国专家学者的重视,开始应用到多个领域。无人机作为一种广泛应用于各行业
电机在工业生产中的重要地位不言而喻,极大的推进了生产力,收获巨大的经济效益,但在恶劣工况下长期工作的电机时常发生故障,导致严重的安全事故。因设备监控技术的发展,累积了大量的电机运行状态数据,借助深度神经网络模型,能够自动提取运行状态数据中的故障特征,因而研究深度神经网络模型在电机故障诊断中的应用具有实际应用价值。为了保证电机的安全运行,摆脱传统诊断技术的种种缺点,本文通过将基于卷积神经网络的深度诊
下肢外骨骼机器人作为以人为中心的人机协同智能系统,需要通过对人体运动状态信息进行解析,从而增强人机协同柔顺性。表面肌电信号(surface Electromyography,s EMG)是人体的主要生理信号之一,由于其包含有人体运动信息,被广泛应用于人机协同领域。为了提高人机协调性,主流方法是通过s EMG信号与关节角度完成映射解码。目前,在人体下肢角度预测方面已取得一些成果,但预测精度有待提升,
无论是精准定位人体静脉血管从而辅助静脉注射,还是提取静脉特征用于识别进行身份认证,获取准确清晰且直观的静脉信息都至关重要。然而,通过红外摄像头采集到的红外静脉血管图像质量较低。采用当前已有的红外静脉图像处理算法提取的静脉信息往往存在大量断点,且各子段静脉粗细不均,与实际静脉差异较大。因此,针对红外静脉血管图像提取的静脉信息不准确直观的问题,本文基于静脉自身特征分别从静脉图像的增强与分割,断点的修复
在现代的制造业中,数控机床占有核心地位,任何重大装备的制造都离不开数控机床。而数控机床的一些运动部件在整个机床中起重要的作用,当这些运动部件产生故障时,会对整个机床造成巨大的影响,并且这些运动部件在可靠性上的表现往往与整机不同,除此之外,过往的研究对运动部件可靠性建模往往只针对某一个具体的部件,并没有为统一的运动部件建立故障概率模型。对运动部件而言,有的本身就是一个元动作单元,有的进行结构化分解之
随着老龄化的形势越发严峻,我国正在积极推动养老服务体系的建设。社区养老模式作为其中的重要一环,起着衔接家庭养老与机构养老模式的关键作用,能够让老年人在熟悉的环境内享受到全面的照料服务。社区老年人日间照料设施作为社区养老模式的依托,强调原宅养老的理念,重视与家人、与友邻,是老年人较为需求的养老设施。但在社区日间照料设施的使用调查中发现,大部分设施都存在许多功能房间及设施利用率很低的现象。因此,探讨社
涌浪是滑坡失稳下滑后,由于其对河道水流的巨大冲击力而引发的次生灾害。目前学界对滑坡涌浪课题的研究主要包括涌浪高度、涌浪衰减规律以及涌浪的爬坡特性等。在已有的研究成果中,学者们提出了简易的最大涌浪高度和涌浪最大爬坡高度的预测模型,但由于考虑参数不全以及没有针对不同河道而做出针对性研究,所以得出的预测模型适用范围有限。基于前人的研究成果,本文将通过多因素分析,优化预测模型。主要的研究内容如下:(1)基
石墨烯作为固体润滑材料已获得广泛的研究,但实验制备的石墨烯表面存在大量的原子级台阶,且环境分子易于吸附在具有丰富悬键的台阶边缘,这两者都可能对石墨烯摩擦学特性产生重要影响。本文应用Reax FF反应力场分子动力学模拟方法,研究了环境条件(真空,潮湿环境)、台阶边缘功能基团(氢钝化,羟基钝化)等对石墨烯台阶处摩擦行为、耐磨特性和承载能力的影响与作用机制。主要研究内容如下:(1)模拟了金刚石探针在石墨
随着电子商务的迅速发展,快递物流行业的“最后一公里”问题日益突显,因此,物流机器人应运而生。但是,目前的物流机器人主要是实现室外路段的配送,其要真正减轻或替代快递员的工作,首先要实现机器人的爬楼越障功能,使其能够进入室内环境,为用户提供送货上门服务。因此,本课题以实现机器人爬楼越障功能为重点,同时将太阳能电池引入机器人电源系统,充分利用新能源的优势,既可以提高机器人的续航,还积极响应了“碳达峰”、