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Bcl-6(B cell lymphoma6)属于抗细胞凋亡的原癌基因，表达于T、B淋巴细胞中。当T、B细胞受到抗原及细胞因子刺激后，促进Bcl-6的表达，从而加快T、B细胞有丝分裂，迁移至淋巴细胞的中心滤泡区域，形成生发中心。Bcl-6是生发中心形成的重要信号，缺乏该信号会导致辅助性T淋巴细胞、B淋巴细胞分化严重受损，无法形成生发中心。转录因子Blimp-1(B lymphocyte induced maturation protein1,Blimp-1)与Bcl-6是一对相互拮抗的转录调节因子，表达生理水平Blimp-1的CD4+T细胞向滤泡型辅助性T淋巴细胞（Follicular helper T lymphocytes,Tfh）分化受到抑制。目前普遍认为，在原发性干燥综合征的发生发展过程中，T、B淋巴细胞过度活化参与了外分泌腺灶性淋巴细胞（生发中心）的形成，引起唾液腺、泪腺分泌功能降低，引起口干、眼干等症状。另一方面T、B细胞过度活化导致多种自身抗体产生，引起的全身性多器官免疫性损伤。缘于Bcl-6诱导、维持生发中心形成，从而推测可能参与了原发性干燥综合征的免疫紊乱和免疫损伤，本文拟检测原发性干燥综合征患者Bcl-6/Blimp-1蛋白的异常表达及分析其临床意义。目的：检测原发性干燥综合征患者唇腺组织中淋巴细胞浸润程度，同时检测Bcl-6/Blimp-1蛋白在T、B淋巴细胞中的表达情况，并探讨其与淋巴细胞浸润程度的线性关系、与脏器受累的关系及与实验室指标之间的相关性，进一步分析其在原发性干燥综合征中的致病作用，探讨Bcl-6/Blimp-1蛋白在原发性干燥综合征发生、发展中的生物学作用。方法：选择2012年3月至2013年12月在河北医科大学第二医院免疫风湿科原发性干燥综合征患者30例作为疾病组，其中包括继发肾小管酸中毒患者2例，血液系统受损患者8例，周围神经病变患者2例，肺间质纤维化患者5例，无系统损害的患者13例。所有患者在唇腺活检术前未经激素及免疫抑制剂治疗。另选择口腔外科黏液腺囊肿、下唇外伤等非自身免疫性疾病患者11例作为对照组。所有研究对象唇腺组织标本均由10%中性甲醛固定，石蜡包埋，HE染色，免疫组织化学方法检测所有标本中Bcl-6、Blimp-1蛋白的表达，显微镜下观察两组间Bcl-6、Blimp-1蛋白的表达、定位及与淋巴细胞、浆细胞浸润、生发中心形成的关系。在组织切片中，计数5个高倍镜视野中的阳性细胞数目，并据阳性细胞数比例＜1%，1%-25%，26%-50%，51%-75%，＞75%分别计为0分，1分，2分，3分，4分；根据染色强度分为染色强度弱、中、强三个等级，分别记为1分，2分，3分，阳性细胞数目比例评分×染色强度评分为每例标本最后综合计分，综合记分≥1为表达阳性，<1则为阴性。根据Chisholm唇腺病理分级标准，将所有标本分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4个等级，分别代表少量淋巴细胞浸润、中等量淋巴细胞浸润、一个淋巴细胞灶浸润、多个淋巴细胞灶浸润。采用SPSS13.0（SPSS Company, Chicago，Illinois，USA）版统计软件进行统计分析，两组间比较采用两组独立样本比较的秩和检验；多组间Bcl-6、Blimp-1蛋白表达的比较采用多组独立样本比较的秩和检验，两等级资料间相关性分析采用spearman相关系数。统计描述采用中位数（medican,M）、上四分位（interquartile up,QU）、下四分位（interquartile low,QL）。以检验水准α=0.05，P＜0.05为有统计学意义。结果：1光镜下观察，正常对照组唇腺组织腺泡大小均匀，导管排列整齐，无扩张，间质无或少量炎性细胞浸润；疾病组腺泡大小不等，部分腺体萎缩，以导管周围为明显，间质有1个或多个灶性淋巴细胞浸润；2疾病组与对照组Bcl-6蛋白表达水平评分分别为3.0(2.0，4.0)、0.0（0.0,1.0）分，二者差异的比较有统计学意义（z=4.670，P＜0.001）；疾病组组织切片中导管细胞及其周围淋巴细胞均可检测到Bcl-6蛋白的表达，腺泡细胞偶可检测到阳性细胞。经统计学分析Bcl-6蛋白表达与导管周围淋巴细胞浸润程度呈显著正相关（rs=0.644，p＜0.001），说明Bcl-6蛋白与淋巴细胞浸润程度有关。3疾病组与对照组Blimp-1蛋白表达水平评分分别为3.0（2.0,4.0）、1.0（0.0,1.0）分，二者差异的比较有统计学意义（z=4.606，P＜0.001）；疾病组组织切片中导管细胞及其周围淋巴细胞均可检测到Blimp-1蛋白的表达，腺泡细胞偶可检测到阳性细胞。经统计学分析Blimp-1蛋白表达与导管周围淋巴细胞浸润程度呈显著正相关（rs=0.637，p＜0.001），说明Blimp-1蛋白与淋巴细胞浸润程度有关。4疾病组中，临床系统受累中的比较：肾小管酸中毒组、血液系统受累组、周围神经病变组、肺间质纤维化组及无系统损害组PSS患者Bcl-6蛋白的表达水平评分分别为3.5（1.0*,6.0*）、3.0（2.0,3.0）、4.5（3.0*,6.0*）、4.0（2.5,4.0）、3.0（2.5,4.0）分，经统计学分析，差异无统计学意义（2=4.436，P=0.350）；五组Blimp-1蛋白的表达水平评分分别为2.5（1.0*,4.0*）、3.0（2.0,4.0）、3.0（2.0*,4.0*）、4.0（3.0,6.0）、2.0（2.0,4.0）分，经统计学分析，差异无统计学意义（2=4.898，P=0.298）；5疾病组中，实验室指标的比较：免疫球蛋白（IgG）升高组、正常组Bcl-6蛋白表达水平评分分别为3.0（3.0,4.0）、3.0（2.0,3.0）分，经统计学分析，差异无统计学意义（z=1.126，P=0.260）；IgG升高组、正常组，Blimp-1蛋白表达水平评分分别为4.0（2.0,4.0）、2.0（2.0,4.0）分，经统计学分析，差异无统计学意义（z=1.454，P=0.146）；经统计学分析，在β2微球蛋白升高组和正常组，Bcl-6/Blimp-1蛋白的表达水平无统计学意义。6相关性分析显示，疾病组淋巴细胞灶的表达中Bcl-6蛋白与Blimp-1蛋白的表达水平呈显著正相关（rs0.566, P0.001）。结论：原发性干燥综合征组患者唇腺组织中生发中心Bcl-6、Blimp-1的表达增高，且与唇腺组织中淋巴细胞的浸润程度有关，提示：两种转录因子蛋白可能参与了原发性干燥综合征的发病机制，换言而之，Tfh细胞可能在PSS患者唾液腺功能损伤中发挥重要作用。