【摘 要】
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背景与目的:多种病毒可感染男性生殖系统并释放到精液中,可能发生性传播。然而只有少数病毒被证明可以通过性传播。精液对病毒感染活性及性传播的影响,目前尚缺乏了解。本论文着重研究人类精浆（seminalplasma,SP）对两种生殖系统常见病毒:腮腺炎病毒（mumps virus,MuV）与1型单纯疱疹病毒（herpes simplex virus type 1,HSV-1）感染活性的影响,分析SP的抗
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背景与目的:多种病毒可感染男性生殖系统并释放到精液中,可能发生性传播。然而只有少数病毒被证明可以通过性传播。精液对病毒感染活性及性传播的影响,目前尚缺乏了解。本论文着重研究人类精浆（seminalplasma,SP）对两种生殖系统常见病毒:腮腺炎病毒（mumps virus,MuV）与1型单纯疱疹病毒（herpes simplex virus type 1,HSV-1）感染活性的影响,分析SP的抗病毒活性。材料与方法:以子宫颈癌细胞（HeLa）作为靶细胞,用于研究病毒感染活性,MuV与HSV-1在非洲绿猴肾细胞（Vero）中扩增。利用TCID50实验测定MuV和HSV-1的滴度以及培养基上清中的病毒载量;Western blot检测蛋白质水平;实时qRT-PCR检测基因mRNA水平;细胞免疫荧光染色检测病毒颗粒在细胞中的分布情况;用倒置显微镜观察活细胞的形态变化;用CCK-8实验评价细胞活性。此外,还利用附睾上皮细胞（EECs）、人宫颈癌细胞（C33A）和小鼠睾丸上皮细胞（15P1）作为靶细胞,用于研究SP对MuV在其它靶细胞中的作用。实验结果:MuV可有效感染HeLa细胞并进行复制。SP预处理MuV可破坏病毒的感染能力。SP经过沸水加热、蛋白酶（ProK）、RNA酶A（RNase A）、DNA酶Ⅰ（DNase Ⅰ）、糖基肽酶（PNGase F）及脂肪酶（Lipase）分别处理后,不影响SP抑制MuV感染Hela细胞的能力。SP中抑制MuV感染的主要成分介于3-100 kDa之间。HSV-1也可感染HeLa细胞并进行复制。HSV-1感染HeLa细胞后可导致细胞形态发生改变。SP预处理后可抑制HSV-1感染HeLa细胞。HSV-1与SP共孵育后可降解HSV-1蛋白,沸水处理SP可阻断其降解HSV-1蛋白的能力。SP中抑制HSV-1感染和降解病毒蛋白的活性成分大于100 kDa。结论:SP可抑制MuV和HSV-1的感染活性。SP中抑制MuV感染的成分具有耐热性,并且该成分既不是蛋白质和核酸,也不是脂质和糖分子。而SP中抑制HSV-1感染的成分对热敏感并且能降解病毒蛋白。这些结果表明SP中存在不同的抗病毒成分,进一步分析与分离SP中的抗病毒成分可为认识男性生殖系统的抗病毒能力提供新的线索。
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