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灵芝液体发酵物是指在适当培养基和培养参数控制下，通过液体发酵产生的菌丝体和次生代谢物，本文将灵芝液体发酵物过滤去除菌丝体后的其余物质定义为灵芝液体发酵液。本研究以菌丝体产量为指标对灵芝液体发酵培养基和发酵条件进行了优化筛选。在1d鸡的饲粮添加发酵菌丝体(200g/T)或饮用液体发酵液(2ml/d/只)至21d研究其对鸡免疫功能的调节和对肠道菌群的影响，为灵芝液体发酵物在鸡生产中应用提供理论依据。其主要实验结果如下：
(1)发酵罐培养灵芝菌丝体最适条件为：20g/L葡萄糖、3g/L磷酸二氢钾、1.5g/L无水硫酸镁、0.05g/LVB1、20g/L麦麸粉、12g/L黄豆粉、接菌量1%、初始pH5、温度30℃、通气量1.1L/s，168h发酵液含菌丝体1.87g/L。
(2)添加灵芝液体发酵菌丝体与对照组相比：①血清IL-2和IL-4含量7d和21d时差异不显著(P＞0.05)，14d时分别提高了4.98%和13.21%、差异显著(P＜0.05)；IFN-γ含量与对照组相比，7d时提高10.52%、差异极显著(P＜0.01)，14d时提高6.65%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)。②21d时脾脏和胸腺IL-2、IL-4和IFN-γ的mRNA表达量分别上调51.13%、23.14%，49.31%、17.41%和21.04%、21.13%差异极显著(P＜0.01)。③外周血淋巴细胞转化值7d时差异不显著(P＞0.05)，14d时提高8.77%、差异显著(P＜0.05)，21d时提高43.75%、差异极显著(P＜0.01)。④7d和14d时外周血CD4+T含量分别提高7.85%和8.24%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)；7d时外周血CD8+T含量与对照组相比提高8.78%、差异显著(P＜0.05)，14d和21d时差异不显著(P＞0.05)；7d、14d和21d时外周血CD4+T/CD8+T比值与对照组相比差异不显著(P＞0.05)。⑤血清新城疫抗体滴度14d和21d时分别提高16.27%和13.21%、差异显著(P＜0.05)。⑥21d时盲肠大肠杆菌数量降低5.52%、差异显著(P＜0.05)；乳酸杆菌和双歧杆菌数量分别提高了10.19%和11.61%、差异显著(P＜0.05)；增加21d时回肠和盲肠的ERIC-PCR指纹图谱中条带数量，丰富肠道菌群。
(3)添加灵芝液体发酵液与对照组相比：①血清IL-2和IL-4含量7d时差异不显著(P＞0.05)，14d时分别提高了7.68%和8.37%、差异显著(P＜0.05)，21d时分别提高了14.78%、差异极显著(P＜0.01)；血清IFN-γ含量7d和14d时分别提高了3.07%和2.25%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)。②21d时脾脏和胸腺IL-2、IL-4和IFN-γ的mRNA表达量分别上调了56.41%、31.35%，51.13%、21.22%和27.12%、26.31%差异极显著(P＜0.01)。③外周血淋巴细胞转化值7d和14d时差异不显著(P＞0.05)，21d时提高31.25%、差异极显著(P＜0.01)。④7d、14d和21d时外周血CD4+T含量分别提高了10.17%、12.46%和6.96%，差异显著(P＜0.05)；7d和14d时外周血CD8+T含量分别提高了9.14%和4.87%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)；14d时外周血CD4+T/CD8+T比值提高6.45%、差异显著(P＜0.05)，7d和21d时差异不显著(P＞0.05)。⑤14d和21d时血清新城疫抗体滴度差异不显著(P＞0.05)。⑥21d时盲肠大肠杆菌数量差异不显著(P＞0.05)；乳酸杆菌和双歧杆菌数量分别提高了5.57%和9.72%，差异显著(P＜0.05)；增加21d时回肠和盲肠的ERIC-PCR指纹图谱中条带数量，丰富肠道菌群。
灵芝液体发酵物可以提高鸡血清IL-2、IL-4和IFN-γ含量；上调脾脏和胸腺的IL-2、IL-4和IFN-γ表达量；提高外周血淋巴细胞转化值、CD4+T含量、CD8+T含量和CD4+T/CD8+T比值；提高血清新城疫抗体滴度；降低盲肠大肠杆菌数量、提高乳酸杆菌和双歧杆菌数量；丰富回肠和盲肠的肠道菌群。灵芝液体发酵物对鸡细胞免疫和体液免疫功能有较强的调节作用、促进肠道健康。
(1)发酵罐培养灵芝菌丝体最适条件为：20g/L葡萄糖、3g/L磷酸二氢钾、1.5g/L无水硫酸镁、0.05g/LVB1、20g/L麦麸粉、12g/L黄豆粉、接菌量1%、初始pH5、温度30℃、通气量1.1L/s，168h发酵液含菌丝体1.87g/L。
(2)添加灵芝液体发酵菌丝体与对照组相比：①血清IL-2和IL-4含量7d和21d时差异不显著(P＞0.05)，14d时分别提高了4.98%和13.21%、差异显著(P＜0.05)；IFN-γ含量与对照组相比，7d时提高10.52%、差异极显著(P＜0.01)，14d时提高6.65%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)。②21d时脾脏和胸腺IL-2、IL-4和IFN-γ的mRNA表达量分别上调51.13%、23.14%，49.31%、17.41%和21.04%、21.13%差异极显著(P＜0.01)。③外周血淋巴细胞转化值7d时差异不显著(P＞0.05)，14d时提高8.77%、差异显著(P＜0.05)，21d时提高43.75%、差异极显著(P＜0.01)。④7d和14d时外周血CD4+T含量分别提高7.85%和8.24%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)；7d时外周血CD8+T含量与对照组相比提高8.78%、差异显著(P＜0.05)，14d和21d时差异不显著(P＞0.05)；7d、14d和21d时外周血CD4+T/CD8+T比值与对照组相比差异不显著(P＞0.05)。⑤血清新城疫抗体滴度14d和21d时分别提高16.27%和13.21%、差异显著(P＜0.05)。⑥21d时盲肠大肠杆菌数量降低5.52%、差异显著(P＜0.05)；乳酸杆菌和双歧杆菌数量分别提高了10.19%和11.61%、差异显著(P＜0.05)；增加21d时回肠和盲肠的ERIC-PCR指纹图谱中条带数量，丰富肠道菌群。
(3)添加灵芝液体发酵液与对照组相比：①血清IL-2和IL-4含量7d时差异不显著(P＞0.05)，14d时分别提高了7.68%和8.37%、差异显著(P＜0.05)，21d时分别提高了14.78%、差异极显著(P＜0.01)；血清IFN-γ含量7d和14d时分别提高了3.07%和2.25%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)。②21d时脾脏和胸腺IL-2、IL-4和IFN-γ的mRNA表达量分别上调了56.41%、31.35%，51.13%、21.22%和27.12%、26.31%差异极显著(P＜0.01)。③外周血淋巴细胞转化值7d和14d时差异不显著(P＞0.05)，21d时提高31.25%、差异极显著(P＜0.01)。④7d、14d和21d时外周血CD4+T含量分别提高了10.17%、12.46%和6.96%，差异显著(P＜0.05)；7d和14d时外周血CD8+T含量分别提高了9.14%和4.87%、差异显著(P＜0.05)，21d时差异不显著(P＞0.05)；14d时外周血CD4+T/CD8+T比值提高6.45%、差异显著(P＜0.05)，7d和21d时差异不显著(P＞0.05)。⑤14d和21d时血清新城疫抗体滴度差异不显著(P＞0.05)。⑥21d时盲肠大肠杆菌数量差异不显著(P＞0.05)；乳酸杆菌和双歧杆菌数量分别提高了5.57%和9.72%，差异显著(P＜0.05)；增加21d时回肠和盲肠的ERIC-PCR指纹图谱中条带数量，丰富肠道菌群。
灵芝液体发酵物可以提高鸡血清IL-2、IL-4和IFN-γ含量；上调脾脏和胸腺的IL-2、IL-4和IFN-γ表达量；提高外周血淋巴细胞转化值、CD4+T含量、CD8+T含量和CD4+T/CD8+T比值；提高血清新城疫抗体滴度；降低盲肠大肠杆菌数量、提高乳酸杆菌和双歧杆菌数量；丰富回肠和盲肠的肠道菌群。灵芝液体发酵物对鸡细胞免疫和体液免疫功能有较强的调节作用、促进肠道健康。