皂荚多糖的提取分离、结构的初步分析及部分生物活性研究

被引量 : 5次 | 上传用户:dragoonzj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
皂荚为豆科植物皂荚的成熟荚果,其主要化学成分有皂苷类、黄酮类、甾体类和多糖等,但目前对皂荚的研究利用主要是皂苷类,对其中含量比较多的多糖研究相对比较少,而近年的研究报道表明,多糖具有保护肝脏、调节免疫系统、抗氧化和抗衰老等药理活性,为合理开发利用这一宝贵资源,本文以皂荚为原料,研究皂荚多糖的提取工艺、纯化技术、结构表征及体外的一些活性、抑菌活性,主要研究内容和结果如下:1、研究皂荚多糖的提取和分离纯化工艺。根据单因素和正交试验,确定热水提取工艺为:料液比1:45,50℃回流提取70分钟,提取两次,多糖提取率为35.46%,三因素对皂荚多糖得率的影响次序为:料液比>提取时间>提取温度。皂荚粗多糖首先经85%的乙醇醇沉,除去醇溶性物质和部分变性蛋白质;然后采用不同浓度的乙醇进行分级,向多糖饱和溶液中加入乙醇,使多糖液中乙醇的浓度依次为30%、45%、70%、85%,离心每次所得沉淀,将多糖分为五个等级,本文采用的是70%乙醇沉分级得到的皂荚多糖,Sevag法脱蛋白,中空纤维膜超滤分离,得到四个皂荚多糖部分(GSP-1、GSP-2、GSP-3、GSP-4),分级得到的四个多糖部分,经高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)和凝胶柱层析法测定其纯度和分子量,表明有三个组分(GSP-1、GSP-2、GSP-3)符合多糖纯度的概念,其相对平均分子量大小依次为:4.69×105、3.96×105、3.18×105。2、皂荚多糖结构的初步分析。红外分析光谱分析结果表明,皂荚多糖具有多糖的一般特征吸收峰,红外光谱基本吻合,主要官能团没有显著差异,除GSP-3外,均含有β-吡喃糖。GSP-1、GSP-2、GSP-3、GSP-4采用2M硫酸水解,再用高效液相色谱法(蒸发光散射检测器ELSD)测定各多糖的组成,结果表明GSP-1由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖和半乳糖组成,其组成比例为5.34:2.65:45.13:46.88;GSP-2由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖组成,其组成比例为4.96:14.51:18.27:5.04:57.22;GSP-3由鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖组成,其组成比例为5.50:6.17:5.84:5.98:76.50;GSP-4由木糖、阿拉伯糖、甘露糖和半乳糖组成,其组成比例为3.56:1.82:13.75:80.87。高碘酸氧化的结果表明,皂荚多糖中含有1→6糖苷键,1→2和(或)1→4糖苷键,其中,1→2和(或)1→4糖苷键有可能是多糖主链糖残基的链接方式。刚果红实验表明,皂荚多糖样品仅仅是有可能存在3股螺旋结构的构象。3、研究皂荚多糖的体外抗氧化活性和抑菌活性。还原能力评价,以Vc为参照,总体来看皂荚多糖样品(GSP)的还原能力比Vc的还原能力弱,皂荚多糖样品的还原能力由强到弱为:GSP-2>GSP>GSP-3>GSP-1>GSP-4。羟基的清除率评价表明,随着皂荚多糖浓度的增加,羟基的清除率也在增加;且纯化出的单组分多糖(GSP-1、GSP-2、GSP-3、GSP-4)的羟基清除作用不如总多糖(GSP)对羟基的清除作用好;羟基清除率由强到弱的大致顺序为:GSP>GSP-3>GSP-1>GSP-4>GSP-2,对羟自由基的清除率的CC50依次分别为:0.3790mg/ml、0.4449mg/ml、0.6550mg/ml、0.7660mg/ml和1.0407mg/ml。皂荚多糖对超氧阴离子的抑制作用比较强,尤其是GSP—1、GSP-2和GSP;GSP-3和GSP-4超氧阴离子的抑制能力相对较弱,对超氧阴离子抑制作用的IC90分别为:2.0435mg/ml、2.0618mg/ml、2.2242mg/ml、2.5622mg/ml和3.0378mg/ml。对亚硝基抑制能力比较强,且计量效应明显,GSP-3和GSP的亚硝基抑制率相近,GSP-2的亚硝基抑制能力居中,GSP-1和GSP-4的亚硝基抑制率最弱,对亚硝基抑制作用的CC5o分别为:0.1482mg/ml、0.1527mg/ml、0.2920mg/ml、0.3483mg/ml和0.4057mg/ml。抑菌效果评价表明,在100mg/ml以下浓度范围内,皂荚多糖对革兰氏阳性菌的抑制作用较强;对革兰氏阴性菌大肠杆菌(有抑菌圈的最小浓度:GSP为75mg/ml,GSP-1为50mg/ml,GSP-2为75mg/ml,GSP-4在100mg/ml时仍旧没有抑制作用)有一定的抑制作用,但抑制作用相对金黄色葡萄球菌(有抑菌圈的最小浓度:GSP为75mg/ml,GSP-1为50mg/ml,GSP-2为50mg/ml,GSP-4为75mg/ml)要弱。在100mg/ml以下浓度范围内,皂荚多糖对真菌基本没有抑制作用。
其他文献
随着计算机技术和网络技术的迅猛发展,软硬件的不断更新换代,现今数据成指数爆炸式增长趋势。如此庞大的数据我们称之为海量数据,甚至是大数据。这标志这大数据时代的到来。
数据传输系统是实现电机群远程监控的重要环节,以电力线为媒介传输电机监控数据具有设备成本低、安装方便、没有通信服务费用等优势,但电力线不是专门的通信线路,配电网中的
焊接残余应力在焊接构件中普遍存在,直接影响车架结构的承载能力、降低焊接接头及整个车架构件的疲劳强度,在遇到外力作用时会产生疲劳断裂或脆性断裂而引发事故。只有从结构设
纵观过去几千年丽江本土建筑的发展史,可以看出,丽江的本土建筑一直成功地将习俗、传统文化以及适应地域自然条件的建构技术延续下来,并顽强地抵制住了外界文化的干扰和入侵
古丝绸之路的开辟使中国成为东西文化荟萃之地,伊斯兰教在中国的传播无疑是沿着欧亚大陆古文明干线丝绸之路的沿深而来,中国的建筑也呈现出域外风情,而在今天的中国有三万座
在中国的改革开放政策实施以来,中国人民与外部世界相互作用日益深刻和全面。英语,作为“世界语言”,就像是中国和其他国家之间的桥梁。因此,英语学习和教学的要求也越来越高
教师培训券又称教师教育券,是教育券制度在教师培训领域的创新性应用。在该制度的实行过程中,教育主管部门首先将教师培训经费转化为一种有价票证,并直接发放到教师手中,教师
步入20世纪以来,由于环境的日益恶化,环境资源的不断减少,致使环境问题备受关注,同时导致环境纠纷的日益增多。由于环境资源具有公共财产属性,并且是由不特定的多数社会公众
国际工程承包项目迅猛发展,我国有越来越多的企业进入世界“255强”,在国际工程承包市场上的地位不容小视。但国际承包工程中存在着错综复杂的风险,企业要想利润最大化,首先
砷(As)是白钨矿中常见的杂质元素,通常在冶金过程中需对其进行除杂处理,而As对后续钨产品的影响尚不清楚。以仲钨酸铵(APT)和As单质为原料制备As质量含量为1%的APT-As复合粉末,经