【摘 要】
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[目 的]探讨敲低SAPCD2基因对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭效应的影响及其可能存在的机制。[方 法]1、在TCGA数据库中查询筛选出404例膀胱癌患者的数据,其中包括全基因的转录组数据,利用R软件对SAPCD2基因进行了表达量的差异分析和生存分析。2、基于TCGA数据库中的信息,本课题组进行了 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。3、通过RT-qPCR实验检测SAPCD2基因在膀胱癌细胞中的
【基金项目】
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国家自然基金项目《p42.3基因通过FA/BRCA信号通路调控膀胱癌发生发展的机制研究》，项目编号8216110765； 国家癌症中心攀登基金项目《前列腺癌特异性甲基化基因在少数名族地区早期诊断中的临床研究和推广价值》，项目编号NCC20925B1；
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[目 的]探讨敲低SAPCD2基因对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭效应的影响及其可能存在的机制。[方 法]1、在TCGA数据库中查询筛选出404例膀胱癌患者的数据,其中包括全基因的转录组数据,利用R软件对SAPCD2基因进行了表达量的差异分析和生存分析。2、基于TCGA数据库中的信息,本课题组进行了 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析。3、通过RT-qPCR实验检测SAPCD2基因在膀胱癌细胞中的表达量。4、构建SAPCD2基因敲低和过表达的慢病毒载体,分别转染T24、5637膀胱癌细胞。5、通过细胞克隆形成实验验证膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后的增殖能力。6、通过MTT实验实验验证膀胱癌T24细胞经SAPCD2基因过表达后的增殖能力。7、通过细胞划痕愈合实验验证膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后的迁移情况。8、通过Transwell侵袭实验检测膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后的侵袭能力。9、Western Blot实验探究SAPCD2基因敲低后抑制膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭可能的分子机制。10、利用GraphPad软件统计分析以上获得的实验数据,当P＜0.05时认为具有统计学意义。每个实验重复三次。[结 果]1、通过对TCGA数据库中膀胱癌患者数据的分析,SAPCD2基因在癌和癌旁组织中表达量具有差异（P＜0.05）。生存曲线显示SAPCD2基因高表达与更差的预后结果相关。2、通过GO功能富集分析可得,SAPCD2基因的分子功能与钙粘蛋白结合相关。3、膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后抑制了细胞增殖能力。4、SAPCD2基因过表达促进了膀胱癌T24细胞增殖。5、膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后抑制了癌细胞迁移能力。6、膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后抑制了癌细胞的侵袭能力。7、膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后E-cadherin蛋白表达量增高,N-cadherin蛋白表达量下降。8、膀胱癌细胞经SAPCD2基因敲低后抑制了 Wnt/β-catenin通路中β-catenin蛋白表达和c-Myc蛋白表达。[结 论]1、SAPCD2基因在膀胱癌和癌旁组织中表达具有差异,而且SAPCD2基因的表达量越高与更差的预后相关。2、SAPCD2基因在膀胱癌细胞中高表达。3、SAPCD2基因的分子功能富集在钙粘蛋白结合相关的功能上。4、敲低SAPCD2基因可以抑制膀胱癌细胞的增殖和侵袭,过表达SAPCD2基因可以促进T24细胞增殖,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin通路相关。
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