本论文利用纳米技术,滚环复制,酶切循环,生物条码等循环放大作用,建立了切刻内切酶介导的目标DNA循环放大和滚环复制的信号放大等新型的循环放大方法,通过流动注射化学发光、表面增强拉曼检测等方法实现了DNA和溶菌酶的高灵敏度检测,操作简单、省时、成本较低。本论文的内容主要包括以下三部分:1、研制了一种基于滚环复制放大技术(RCA)和流动注射化学发光技术(FI-CL),通过化学发光信号的变化来实现目标DNA放大检测的方法。靶DNA与发卡DNA杂交,形成切割内切酶的识别位点,剪切后,释放出靶DNA和引物DNA,释放出的靶DNA继续与发卡DNA结合;释放出的引物DNA与溶液中存在的锁扣DNA结合,利用T4连接酶,连接成环,并作为模板发生滚环复制反应形成很多DNA酶的重复单元,DNA酶与氯化血红素结合后,可作为过氧化物模拟酶,催化鲁米诺和过氧化氢的化学发光反应,产生较强的化学发光信号。实现了特定序列DNA的高灵敏度检测,检测限达1.5×10~-1414 M。为生物样品的分析提供了一种快速、简便、灵敏的检测方法。2、基于酶切循环、滚环复制放大(RCA)以及生物条码技术,通过表面增强拉曼光谱(SERS)技术来实现对靶DNA的检测。合成纳米金胶,组装拉曼信号分子罗丹明标记的DNA和捕获DNA,制备了携带有大量罗丹明标记DNA的纳米金生物条码利用滚环复制技术的扩增作用形成长链,与拉曼信号分子探针编码的生物条码杂交,通过表面增强拉曼光谱(SERS)实现了靶DNA的高灵敏度检测。3、基于循环信号放大以及生物条码技术,设计了一种表面增强拉曼检测方法,组装了MB-DNA-生物条码探针复合物与溶菌酶适体链杂交,在溶菌酶存在下,其与适体DAN链互补,将MB-DNA-生物条码探针复合物释放到溶液中去,经链聚合生长反应,会替下适体互补的溶菌酶,释放的溶菌酶重新与适体DNA链结合,实现检测信号的循环放大,通过验证实验和条件优化,证明了方法的可行性。