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目的:通过建立Langendorf离体鼠心灌流模型,于4℃低温下保存大鼠停搏心脏6小时,观察复灌复跳后大鼠心功能指数的恢复程度、心肌超微结构的改变,探讨维拉帕米联合HTK液对心肌保护的作用机制。方法:30只健康SD雄性大鼠(体重350-500g/只)随机分为实验组与对照组,各组均予以戊巴比妥液行腹腔全身麻醉后,迅速取心悬挂于Langendorff灌注模型上。对照组予以单纯HTK液作为心肌停搏液进行灌注,实验组停搏液则在HTK液的基础上,配入维拉帕米5mg/L。心脏停搏,4℃低温下保存大鼠心脏6小时后,以37℃K-H液复灌,心肌复跳。生理仪记录缺血前、复灌20min、40min、60min、80min时血流动力学各指标值,留取心脏复灌45min时冠脉流出液作心肌酶学检测,实验结束后各组留取样本以行常规病理切片及电镜切片观察微观结构变化。结果:1.1例因操作不熟练致提取心脏时间延长、1例因灌注管插入过深导致主动脉瓣毁损、1例因室温过低、1例因灌注管管径过大无法插入而导致实验失败,其余26例在应用了室内加热器、不同管径灌注针、自制球囊测压管及加快操作速度后,模型均制备成功。2.血流动力学变化:实验组和对照组在血流动力学的LVESP、LVSP、±DP/DT指标之间保持着一致性。复灌40min时,LVSP恢复至最佳状态,之后逐渐下降,60min以后对照组较实验组下降更显著;对照组LVEDP复灌后均呈现增长趋势,实验组LVEDP复灌60min前处于增长趋势,60min后呈现下降趋势。3.心肌酶学指标:心肌复灌后,心脏复跳45分钟时冠脉流出液中心肌酶漏出量CK-MB、AST、LDH1,对照组均明显高于实验组。4.心肌切片HE染色显示对照组:心肌结构存在,部分心肌纤维排列整齐,缩短,部分肌节破坏,典型心肌广泛波浪状变;实验组:心肌结构清楚,心肌纤维排列整齐,肌节结构基本清楚,胞浆和肌原纤维颜色变浅。5.心肌电镜切片显示对照组:心肌结构存在,部分心肌纤维溶解,肌节结构基本清楚,部分Z线稍有模糊。线粒体数目明显增多,轻度肿胀,未见糖原蓄积,核及染色质未见显著改变;实验组:心肌结构较清楚,心肌排列整齐,肌节结构基本清楚。线粒体、肌质网等细胞器数量及形态未见显著改变。未见糖原增多,核及染色质未见显著改变。结论:低温缺氧再灌注下,维拉帕米联合HTK液较单独使用HTK液对心肌细胞具有更明显的保护作用。