研究背景急性肾损伤（AKI）是目前临床上常见的肾脏疾病,严重时可危及生命。10-30%的AKI会向慢性化进展[26,27],最终引起慢性肾脏病（CKD）和终末期肾病（ESRD）。一次发作的严重急性肾损伤（AKI）,可造成肾脏长期损害,继而引发肾脏慢性炎症和肾脏纤维化,最后导致CKD。在AKI发生后,肾脏中固有和外周浸润的免疫细胞,通过一系列的激活和募集反应导致肾脏肾单位结构和功能的改变,引起肾脏纤维化。T淋巴细胞、B淋巴细胞、中性粒细胞、树突状细胞及单核/巨噬细胞等这些免疫细胞参与并调控肾脏炎症反应、组织重塑和修复。过去的研究已证实,肾损伤中追踪到的外周来源免疫细胞对于AKI-CKD转归起着关键作用[9,12],但目前的研究仍缺乏对外周来源的各种免疫细胞迁移到肾脏后生存状态的动态变化的相关认识。基于此,我们对外周来源免疫细胞进行追踪,观察其进入损伤肾脏后不同时间点中的存活及转归情况。方法与结果第一部分中,我们通过对连体共生模型进行改进,提高了连体共生模型的存活率,并构建“连体共生再解离”模型,实现了对外周免疫细胞进行长期追踪的目的。首先我们对GFP小鼠与C57小鼠实施外科手术构建了连体共生模型,在连体共生四周后对其叠加IRI（肾脏缺血再灌注损伤）手术造成肾脏急性损伤,然后再通过手术将连体共生的小鼠解离开,解离一段时间后处死小鼠,收集标本,应用流式细胞术,检测C57小鼠中的免疫细胞嵌合变化情况。通过观察其手术生存情况和检测小鼠连体共生后嵌合率,证实连体共生再解离模型成功构建。第二部分中,我们将连体共生模型分为四组,分别为:连体共生4周后处死小鼠、连体共生4周叠加IRI 3天后处死小鼠、连体共生4周叠加解离14天后处死小鼠、连体共生4周叠加IRI 3天再叠加解离14天后处死小鼠共四组。流式细胞术检测C57小鼠外周血和肾脏中来自于GFP小鼠的异体外周来源免疫细胞的嵌合率。检测发现连体共生小鼠中外周血各免疫细胞嵌合率平均大约为50%,证实连体手术可成功实现小鼠间血液中各免疫细胞的自由交换。解离14天后,在外周血和肾脏中,不同免疫细胞的嵌合率不同,不同种类外周来源的免疫细胞在肾脏中的生存率各异。在连体共生叠加IRI 3天再解离14天模型中,C57小鼠中仍然有较多外周来源T淋巴细胞（38.20%,占肾脏CD45阳性细胞的比例）在肾脏存留,外周来源的巨噬细胞（17.1%）次之,外周来源中性粒细胞（14.44%）较少。该实验结果表明,不同类型免疫细胞在肾损伤后的生存和转归情况存在差异,这提示我们在治疗进展性肾脏病的过程中,针对各阶段致纤维化的细胞应该采取更具有靶向性特异性的干预措施。结论1.连体共生再解离模型可成功实现对异体来源细胞的长期追踪,观察其生存及转归情况。2.连体共生再解离手术不影响驻留肾脏免疫细胞的正常组成。在正常或损伤肾脏驻留的F4/80hi和F4/80low巨噬细胞均存在外周单核细胞的来源和补充。3.在AKI进程中,外周来源的T淋巴细胞在损伤肾脏的生存周期较长,以外周来源的CD4+T淋巴细胞为主。4.肾脏损伤微环境可延长外周来源巨噬细胞在损伤肾脏的生存。