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研究背景及目的: 鼻咽癌是我国华南地区、东南亚以及北非地区常见的头颈部恶性肿瘤之一。其发病因素主要包括EB病毒感染、遗传易感性、吸烟和饮酒以及环境致癌因素。鼻咽癌以放射治疗为主,但是鼻咽癌的远处转移仍然是多数患者预后不良的主要原因。因此,找到更多能预测鼻咽癌远处转移和评估鼻咽癌患者预后的分子生物指标,对指导鼻咽癌的治疗及提高患者的生存率是至关重要的。 PTK6(protein tyrosine kinase 6),又被称为乳腺癌激酶(BRK),是一种细胞内的非受体型Src相关的酪氨酸激酶。PTK6高表达于许多上皮来源的肿瘤,例如乳腺癌、卵巢癌、结肠癌、头颈部肿瘤、非小细胞型肺癌以及恶性黑色素瘤中。据报道PTK6高表达在肿瘤的演进中能够通过加强肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移以及非锚定依赖性生存能力发挥作用。本课题的目的就是研究PTK6在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达情况,以及其与鼻咽癌患者临床病理特征和预后的关系,最终探讨PTK6是否能成为一个鼻咽癌诊断和判断预后的分子生物学指标。 材料与方法: 用实时荧光定量PCR和免疫印迹技术(Western blotting)分别检测鼻咽癌细胞系和永生化鼻咽上皮细胞系细胞PTK6mRNA和蛋白水平的表达。运用实时荧光定量PCR检测31例鼻咽癌和16例非癌鼻咽粘膜组织PTK6在mRNA水平的表达差异。利用免疫组化检测178例鼻咽癌和10例正常鼻咽上皮石蜡组织标本中PTK6的表达水平,用于免疫组化的组织标本都有完整的临床随访资料。所有用于实时荧光定量PCR和免疫组化的组织标本都来源于中山大学肿瘤防治中心。采用SPSS17.0软件包进行统计分析PTK6表达水平与临床病理特征及鼻咽癌患者预后的相关性。采用瞬时转染的方法使细胞过表达PTK6,并且通过细胞克隆形成实验和增殖实验检测PTK6对细胞增殖能力和转化能力的影响。 结果: 1.PTK6在鼻咽癌细胞系的表达在mRNA和蛋白水平上都高于永生化鼻咽上皮细胞系。 2.PTK6在鼻咽癌活检组织标本中mRNA表达水平高于非癌鼻咽粘膜活检组织标本。 3.免疫组化的结果显示PTK6与鼻咽癌的T分期(P<0.001),TNM临床分期(P<0.001),以及转移(P=0.016)相关;但是与其他的临床病理特征,如患者年龄、性别、N分期、复发以及WHO(World Health Organization)分型却没有明显相关性。 4.Kaplan-Meier生存分析显示高表达和低表达组患者五年生存率分别为47.8％和80.0%(P<0.001),表明高表达PTK6的鼻咽癌患者比低表达PTK6的患者预后更差,尤其是在临床晚期病人中更加明显。多因素分析表明PTK6的表达水平是影响鼻咽癌预后的独立风险因素(P<0.001)。 5.过表达PTK6可以增强鼻咽癌细胞的增殖和克隆形成能力。 结论: 高表达PTK6与鼻咽癌的远处转移及患者的不良预后相关,并且是影响鼻咽癌预后的一个独立风险因素。此外,PTK6的高表达有可能成为一个判断鼻咽癌预后的潜在的分子生物学指标。