毛细管电泳—电化学发光检测技术在食品检测中的应用实例

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毛细管电泳(Capillary Electrophoresis,CE)是以毛细管为分离通道,高压直流电场为驱动力,依据被分析物之间淌度来实现高效快速分离的分离技术。分离效率高、样品用量少、分离速度快等是毛细管电泳最突出的优点。电化学发光(Electrogenerated Chemiluminescence,ECL)是电化学检测与化学发光检测相结合的一种具有灵敏度高、仪器设备简单、操作方便、控制性好和选择性强等优点的检测技术。将毛细管电泳与电化学发光检测实现联用是现如今分析化学领域中备受瞩目的一项研究前沿。近年来,基于Ru(bpy)32+的电化学发光检测技术与毛细管电泳分离技术的联用受到了人们前所未有的关注。毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光联用技术兼具了毛细管电泳分离高效及电化学发光检测灵敏的特点,已经广泛应用于食品检测领域。本论文的目的在于研究毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光联用技术在食品检测中的应用,开发基于毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光联用技术的食品检测新方法。主要研究内容和结果如下:1.建立了毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光联用技术检测金线鱼中的组氨酸的新方法。实验表明:在优化的最佳条件下,组氨酸ECL强度与组氨酸浓度呈良好的线性关系(线性范围100500 mg/L),其线性方程为I=0.9082c-48.72,相关系数r=0.9985,检出限(S/N=3)为66.8 mg/L。采用CE-ECL法对金线鱼中的组氨酸进行分析检测,峰高及迁移时间的相对标准偏差(RSD)值0.25%和0.06%,加标回收率为92.87104.39%。与国标法相比,CE-ECL法将原本需要40 min以上的分析时间缩短到15 min,提高了分析效率。2.建立了毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光联用技术检测猪不同部位的盐酸克伦特罗的新方法。实验表明:在优化的最佳条件下,盐酸克伦特罗ECL强度与盐酸克伦特罗浓度呈良好的线性关系(线性范围0.011 mmol/L),其线性方程为I=192.57c+17.197,相关系数r=0.9976,检出限(S/N=3)为0.006 mmol/L。采用CE-ECL法对猪梅花肉中的盐酸克伦特罗进行分析检测,峰高及迁移时间的相对标准偏差(RSD)值0.69%和0.86%,加标回收率为91.0694.20%。与国标法相比,CE-ECL法省略了复杂繁琐的净化和衍生化的前处理步骤,简化了检验步骤;同时克服了酶联免疫法重现性差的问题,优化了重现性问题。3.建立了毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光联用技术检测自酿葡萄酒中的腐胺和亚精胺的新方法。实验表明:在优化的最佳条件下,腐胺和亚精胺ECL强度分别与腐胺和亚精胺浓度呈良好的线性关系(腐胺线性范围0.14 mmol/L,亚精胺线性范围0.052 mmol/L),腐胺线性方程为I=100.22c+113.22,相关系数r=0.9974,检出限(S/N=3)为0.1 mmol/L;亚精胺线性方程为I=2271.6c-206.55,相关系数r=0.9962,检出限(S/N=3)为0.05 mmol/L。采用CE-ECL法对自酿葡萄酒中的亚精胺进行分析检测,峰高及迁移时间的相对标准偏差(RSD)值0.15%和0.21%,加标回收率为86.28103.30%。与国标法相比,CE-ECL法省略了衍生化的前处理步骤,简化了检验步骤,同时将原本需要30 min以上的分析时间缩短到15 min,提高了分析效率。4.建立了毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光联用技术检测水产品中的组胺和亚精胺的新方法。实验表明:在优化的最佳条件下,组胺和亚精胺ECL强度分别与组胺和亚精胺浓度呈良好的线性关系(组胺线性范围0.011 mmol/L,亚精胺线性范围0.00150.0075mmol/L),组胺线性方程为I=150.78c+44.54,相关系数r=0.9975,检出限(S/N=3)为4.96×10-4 mmol/L;亚精胺线性方程为I=6426.7c+4.72,相关系数r=0.9978,检出限(S/N=3)为6.00×10-4 mmol/L。采用CE-ECL法对青蛾、花蛤和海瓜子中的亚精胺进行分析检测,峰高及迁移时间的相对标准偏差(RSD)值分别为0.83%和1.58%;0.48%和1.67%;2.03%和1.82%,加标回收率为115.14118.02%;108.82112.34%;102.54119.50%。与国标法相比,CE-ECL法省略了衍生化的前处理步骤,简化了检验步骤,同时将原本需要30 min以上的分析时间缩短到15 min,提高了分析效率。
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