基于金纳米星肝靶向探针的小鼠早期肝纤维化的拉曼光谱研究

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目的拉曼光谱技术是一种物质分子的分析技术,能够在物质的分子水平上反映其内部的结构及组成信息,利用制备的金纳米星肝靶向探针探究小鼠早期肝纤维化肝组织和正常肝组织的表面增强拉曼光谱的差别,为诊断早期肝纤维化提供新方法。方法通过种子介导法制备金纳米星,再利用巯基和氨基化的双功能聚乙二醇连接甘草次酸,进而制备出金纳米星肝靶向探针,分别将两种探针(金纳米星及金纳米星靶向探针)经尾静脉注射到肝纤维化组和正常组的小鼠体内,筛选出10份经Metavir评分诊断为S1期肝纤维化肝组织样本和10份正常肝组织样本,并将样本在InVia+Plus型激光共聚焦显微拉曼光谱仪下行拉曼检测及收集它们图谱进行分析比较。结果金纳米星肝靶向探针较金纳米星对肝组织有着更好的检测效果(12.85倍)及检测重现性,基于金纳米星肝靶向探针收集小鼠正常及肝纤维化组织的拉曼图谱,分析了主要谱峰的振动模式及谱峰归属,选取912cm-1、1041 cm-1、1222 cm-1、1303cm-1、1340 cm-1作为肝组织的特征峰,在代表脂类的1222 cm-1、1303 cm-1位移处,肝纤维化组肝组织拉曼信号强度强于正常组(均P>0.05),表明在肝纤维化进展过程中,肝细胞可发生脂肪变性;在代表糖原的1041 cm-1位移处,正常组肝组织拉曼信号强度明显强于肝纤维化组(P<0.001),在代表葡萄糖的912 cm-1位移处肝纤维化组肝组织信号强度明显强于正常组(P<0.001),提示在肝纤维化病变过程中加快了糖原分解速度,因此导致糖原含量下降,葡萄糖含量升高;而代表蛋白质的1340cm-1位移处信号在肝纤维化中出现了谱峰信号消失的情况,提示肝纤维化病变过程中出现某种蛋白质含量的下降甚至消失的情况。结论金纳米星肝靶向探针可特异性与肝实质细胞结合,利用表面增强拉曼技术可检测到小鼠肝纤维化肝组织和正常肝组织的代谢产物存在明显差异,从而有效区分正常肝组织和肝纤维化肝组织。
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