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研究背景及目的:宫颈癌是女性常见四大癌症之一,严重威胁女性生命健康。早发现、早治疗是其治疗的重要措施。现临床中常用“宫颈癌三阶梯”筛查方案来提高宫颈癌的早期诊断率,然而该方案亦存在一定局限性,如筛查费用高、技术要求高、覆盖范围不足等。因此,进一步优化宫颈癌筛查方法具有重要意义。阴道菌群与女性生殖健康密切相关,参与女性多种生殖疾病的发生。因此,本研究拟从阴道菌群角度出发,通过16S rRNA测序及生物性信息学方法,分析HR-HPV感染、宫颈病变以及宫颈癌患者阴道菌群组成结构,探索菌群在HPV感染-宫颈病变-宫颈癌过程中变化,寻找差异细菌,为提高宫颈癌的筛查效果、改善患者预后提供新方法。研究内容及方法:1、标本收集:选择2019年9月至2020年9月于南昌大学第一附属医院妇科门诊及住院部就诊的符合入组标准的155名女性,收集参与者阴道分泌物,记录患者基本信息、HPV检测、宫颈细胞学检查、阴道镜检查、宫颈癌FIGO分期等结果。2、标本处理:提取阴道分泌物中细菌DNA,并进行16S rRNA基因V4区域扩增,使用Illumina Hi Seq 2500平台对扩增产物进行测序。3、数据分析:采用QIIME分析流程多测序结果按一下组别进行分析,主要包括阴道菌群Alpha多样性分析、Beta多样性分析、LEfse分析等。（1）不同类型HR-HPV感染女性阴道菌群差异性分析:（1）HPV阴性组、（2）HPV16/18阳性组、（3）其他HR-HPV阳性组;（2）不同程度宫颈病变女性阴道菌群差异性分析:（1）Control组、ASC-US组、（3）SIL组、（4）CCa组（3）不同分期宫颈癌患者阴道菌群差异性分析:（1）Control组、（2）I期组、（3）II期组、（4）III期组。研究结果:1、不同类型HPV感染女性阴道菌群分析:（1）α-多样性分析显示,与HPV阴性组对比,HPV16/18阳性组和其他HR-HPV阳性组女性阴道菌群的丰度降低,多样性增加,但差异无统计学意义。β-多样性分析发现三组间阴道菌群存在明显不同。（2）Lactobacillus在HPV阴性、其他HR-HPV阳性和HPV16/18阳性三组中的丰度逐渐降低,Gardnerella和Prevotella丰度逐渐增加。（3）Lefsefe分析显示,与HPV阴性组相比较,HPV16/18阳性组主要以Peptostreptococcu、Bacteroides、granulicatella、Anaerococcu和Arcanobacterium富集为主,其他HR-HPV阳性组主要以Campylobacter富集为主。2、不同程度宫颈病变女性阴道菌群分析:（1）α-多样性发现显示,与Control组对比,ASC-US组、SIL组和CCa组女性阴道菌群多样性中的Shannon指数逐渐增加,β-多样性存在差异性,且有统计学意义。（2）Lactobacillales在ASC-US组、SIL组和CCa组丰度逐渐减少,Bacteroidia和Prevotella的丰度逐渐增加。（3）Lefsefe分析显示,Control组主要以Neisseria、Enterococcus、Staphylococcus和Ralstonia富集为主,ASC-US组主要以Lactobacillales、Bifidobacterium和Haemophilus富集为主,SIL组主要以Veronella富集为主,CCa组主要以Bacteroidia、Clostridia、Prevotella、Sneathia、Anaerococcus、Peptostreptococcus and Fusobacterium富集为主。3、不同分期宫颈癌患者阴道菌群分析:（1）α-多样性发现显示,与Control组对比,宫颈癌I期、II期、III期三组阴道菌群丰度及多样性逐渐增加,β-多样性存在差异性,且有统计学意义。（2）Lactobacillus在Control组丰度最高,I期组次之,II期组和III组明显减少。Anaerococcus和Clostridia在四组中丰度逐渐增加。（3）Lefsefe分析显示,Control组主要以Lactobacillus富集为主,宫颈癌I期主要以Arcanobacterium和Deinococcus富集为主,II期主要以Prevotella、Gemella富集,III期主要以Clostridia和Fusobacterium富集为主。结论:1、HR-HPV感染女性、宫颈ASC-US、SIL以及宫颈癌患者阴道菌群发生紊乱,菌群的组成结构与对照组存在差异。2、不同类型HR-HPV感染女性阴道菌群中,HPV16/18阳性组中Lactobacillus丰度低于其他高危型HPV阳性组,而Gardnerella和Prevotella高于其他高危型HPV阳性组。3、不同程度宫颈病变女性阴道菌群中,随病变程度加重,Lactobacillales丰度逐渐减少,Bacteroidia和Prevotella丰度逐渐增加。4、不同分期宫颈癌患者阴道菌群中,随分期增加,Lactobacillales丰度减少,Anaerococcus和Clostridia丰度逐渐增加。