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随着人类对石油开发的不断增加和石油工业的飞速发展,石油对环境(土壤、地表和地下水)的污染越来越严重,对生态环境的安全和人类健康造成重大危害,含油废水的治理也受到越来越多的重视。微生物修复技术即生物处理修复因其来源广泛、操作简便、无二次污染、处理费用省等优点而备受关注,且处理含油废水时效果良好,已表现出了巨大的潜力,成为近年来国内外学者研究的热点。研究发现,获得高效、广谱、稳定、适应性强的高效石油降解菌株以及配套的治理工艺是利用该技术进行石油污染治理的关键。本文利用微生物方法从长沙某炼油厂排污口长期被石油污染的污泥中采集样品,以汽油为唯一碳源,通过富集培养分离的方法得到两株菌,命名为X和Z。通过形态观察、生理生化试验、16S rDNA全系列分析对汽油降解菌进行初步鉴定;对影响降解菌株生长和汽油降解的相关因素进行试验,以确定各菌株生长和汽油降解的最适条件。试验结果如下:(1)长沙某炼油厂排污口长期被石油污染的污泥中分离得到6株能以汽油为唯一碳源生长的菌株,通过筛选得到2株汽油降解率超过60%的菌株,命名为X和Z。经形态学观察、生理生化试验,初步鉴定X菌为假单胞菌属(Pseudomonas sp),Z菌为芽孢杆菌属(Bacillus sp)。Z同时经结合16S rDNA扩增、测序,运用BLAST检索分析,建立系统进化树,确定与蜡状芽孢杆菌(AH1134)的16S rDNA序列有较高的同源性(相似度99%);在系统发育树上构成一个分支,序列提交基因登录号为EU047593。(2)通过一系列的条件实验得出2株汽油降解菌的生长和降解汽油的最佳条件:初始pH为7.0～8.0,温度37℃,摇床转速180r/min,接种量15%,盐浓度(NaCl)为10g/L,重金属(Cu2+)耐受度为0.1mg/L,表面活性剂(SDS)的最大添加量为100mg/L。X的最适碳源为葡萄糖,最适氮源为氯化铵;Z的最适碳源为蔗糖,最适氮源为硫酸铵。(3)紫外诱变可提高菌株对汽油的降解率,且15W紫外诱变效果优于30W。