肝素亲和生长因子缓控释载体的构建与评价

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目的:   1、以泊洛沙姆188、低分子肝素为原料,合成共价接枝的肝素.泊洛沙姆复合物(HP),并进行表征鉴定;   2、测定并研究合成的肝素.泊洛沙姆复合物的物理性质,对比原来泊洛沙姆188以及肝素两种原料的不同,挖掘其潜在的应用价值;   3、将该合成的肝素.泊洛沙姆复合物应用于不同给药系统中,以成纤维细胞生长因子(FGF)为模型药物,对该材料进行初步的体外体内评价。   方法:   1、利用EDC/NHS方法,以泊洛沙姆188、低分子肝素钠为原料,合成肝素-泊洛沙姆复合物,并通过IR、1HNMR对该材料进行表征;   2、分别从溶解性、固定肝素含量、临界胶束浓度(CMC)、黏度等方面研究新材料的物理性能,通过振动观察不溶性异物是否存在判断其溶解性、利用甲苯胺蓝法测定肝素固定量、利用荧光探针法测定材料的临界胶束浓度、通过黏度计测定不同温度不同浓度下的材料黏度;通过不同浓度泊洛沙姆188与肝素-泊洛沙姆混合时的黏度测定,研究肝素-泊洛沙姆对泊洛沙姆188凝胶化的影响;   3、以成纤维细胞生长因子为模型药物,体外研究该材料对药物的释放行为影响;   4、制备含肝素-泊洛沙姆的含气脂质粒,观察所得脂质粒的形态,并以此初步研究含肝素-泊洛沙姆材料制剂的体内超声造影与药物的超声靶向递送方面的应用。   结果:   合成了肝素-泊洛沙姆复合物,从其溶解性能方面分别扩大了肝素、泊洛沙姆的应用范围,接枝肝素固定量在60%以上;临界胶束浓度方面,HP与泊洛沙姆188的CMC值分别是0.483mg/ml、0.743mg/ml,相比泊洛沙姆,肝素-泊洛沙姆降低,但相同浓度的两溶液,肝素-泊洛沙姆的临界胶化温度升高,0.4g/ml的肝素-泊洛沙姆为43.5℃,泊洛沙姆188是37.3℃。不同浓度的泊洛沙姆混以不同浓度的肝素-泊洛沙姆,其胶变行为有所变化,得到V型曲线,证明,二者在合适比例可得到最低胶变温度;同样浓度下的FGF,接受联合该材料的成纤维细胞72h后增殖活性明显高于单纯FGF和对照组。将该材料联合至脂质材料中制备成脂质粒,含5%肝素-泊洛沙姆浓度的脂质粒相对空白脂质粒,粒径减小,数量减少,可进行体内造影,但时间减少至3s。   结论:   通过本实验成功的合成了肝素-泊洛沙姆复合物新材料,扩大了肝素和泊洛沙姆两类材料的应用范围;合成的新材料可以应用于纳米胶束、凝胶、复合脂质微粒等不同的给药系统研究;由于新材料的温度敏感性,有望应用于温度响应的药物递送系统研究中;通过体外实验证实了该材料对肝素亲和生长因子(如成纤维细胞生长因子等)的缓释作用;体内造影实验表明,含该材料的含气脂质粒具有造影效果,可有望应用到超声造影剂方面,并可进行超声下的药物靶向递释系统,但需要进行下一步的深入细致充分的研究。
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