【摘 要】
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水稻（Oryza sativa L.）是全球人类食用的四大粮食作物之一。由稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae;无性态:Pyricularia oryzae）引起的稻瘟病是世界范围内最难以控制的三大病害之一。经长期的生产实践证明,控制该病害最经济可行且对环境最安全的手段是培育及合理利用抗病品种。然而,在实际生产中抗病品种的抗性一般只能维持3～5年。因此,挖掘、创造新型的抗病基因以培育更加
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水稻（Oryza sativa L.）是全球人类食用的四大粮食作物之一。由稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae;无性态:Pyricularia oryzae）引起的稻瘟病是世界范围内最难以控制的三大病害之一。经长期的生产实践证明,控制该病害最经济可行且对环境最安全的手段是培育及合理利用抗病品种。然而,在实际生产中抗病品种的抗性一般只能维持3～5年。因此,挖掘、创造新型的抗病基因以培育更加持久、广谱的抗病品种具有重要的意义。稻瘟病Pik位点的抗病等位基因Pik、Pik-m、Pik-p、Pik-s、Pik-h、Pi1、Pik-x、Pik-g、Pi7等大多具有广谱和持久的抗性。因此,通过从禾本科植物中发掘,以及利用基因定点突变技术创造新型的Pik基因,再通过转基因技术确认其抗性功能,对于进一步丰富并利用Pik家族于抗病育种计划中具有重要的意义。本研究开展以下几方面的工作,获得的主要结果如下:（1）禾本科植物新型Pik家族转基因后代的抗性遗传经稻瘟病菌株CHL346人工接种及特异性分子标记分析,对禾本科植物新型Pik家族基因Pik-sb、Pik-bd、Pik-bg、Pik-eg转基因植株T2、T3、T4后代进行表型/基因型的共分离分析,结果显示:禾本科植物新型Pik家族抗病基因的抗性均能稳定遗传;同时筛选出了无选择标记且携带目的基因的分离株系/个体,或携带选择标记及目的基因并能稳定遗传表达的抗性纯合株系/个体,得到了相关株系的可视化表型/基因型的共分离分析图,进一步作为抗谱鉴定以及抗病育种的抗源材料。（2）广谱持久抗病基因Pi1定点突变新型Pik家族转基因后代的抗性遗传经稻瘟病菌株CHL346人工接种,对抗病基因Pi1定点突变新型Pik基因Pi1-M1、Pi1-M2、Pi1-M3、Pi1-M4、Pi1-M12、Pi1-M13、Pi1-M14转基因植株T2、T3后代进行表型鉴定,结果显示:Pi1定点突变新型Pik家族抗病基因的抗性均能稳定遗传。利用特异性分子标记对7个新型Pik基因转基因植株T2、T3后代进行基因型鉴定,结果显示:Pi1-M1、Pi1-M2、Pi1-M3、Pi1-M12、Pi1-M13转基因植株T2、T3后代个体特定SNP位点突变成功,而Pi1-M4、Pi1-M14全部或部分个体相关SNP位点未突变成功;同时筛选出了无选择标记且携带目的基因的分离株系/个体,或携带选择标记及目的基因并能稳定遗传表达的抗性纯合株系/个体,得到了相关株系的可视化表型/基因型的共分离分析图,进一步作为抗谱鉴定以及抗病育种的抗源材料。
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