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目的:通过单独及联合应用环氧合酶-2抑制剂尼美舒利和5-脂氧合酶抑制剂AA861处理胃癌AGS细胞,探讨联合抑制COX-2和5-LOX两条通路对胃癌AGS细胞的影响及其可能的作用机制。方法: AGS细胞常规培养,取对数生长期细胞做为实验组。以相差显微镜观察药物处理前后的细胞形态改变;用四氮唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide/MTT)法检测细胞生长增殖情况;采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和丫啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡率,以DNA琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA的改变。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测AGS细胞的5-LOXmRNA表达水平;免疫印迹法(Western blot)检测5-LOX及磷酸化Akt (p-Akt)蛋白的表达水平。结果: 1、相差显微镜观察,药物处理组细胞与对照组相比,形态发生明显改变。2、MTT法与TUNEL染色法表明,尼美舒利呈时间、剂量依赖性抑制AGS细胞增殖,尼美舒利处理组的细胞凋亡率随着剂量的增加而升高。3、MTT(AA861组vs两药组,p<0.01;尼美舒利vs两药组,p<0.05)、TUNEL染色法(单药组vs两药组,p<0.01)、AO/EB染色法(单药组vs两药组,p<0.01)和DNA琼脂糖凝胶电泳法显示,两药组与单药组比较,细胞增殖抑制,凋亡增加。4、RT-PCR和western blot法检测5-LOXmRNA和蛋白表达实验中,尼美舒利及两药联合作用均使细胞5-LOX表达上调(p <0.01),但AA861单独作用却不影响5-LOX表达(p>0.05)。两药联合作用48h,对AGS细胞5-LOXmRNA及蛋白表达没有交互作用(p >0.05)。5、western blot检测p-AKt蛋白表达的实验中,尼美舒利组p-AKt表达升高(p<0.01),AA861组和两药组的p-AKt蛋白表达均降低(p<0.05),且两药组p-AKt蛋白表达量最低。两药联合作用48h,对AGS细胞p-AKt蛋白表达具有交互作用(p <0.01)结论: COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861可抑制胃癌AGS细胞增殖,并诱导凋亡。而两药联合作用COX-2与5-LOX两条通路,能更有效地抑制AGS细胞增殖,诱导凋亡。AGS细胞中存在5-LOX及AKt的表达,在尼美舒利作用下,细胞5-LOX和p-AKt表达升高;而AA861却不影响细胞5-LOX表达,但可降低磷酸化AKt的蛋白表达量,同时,两药联合作用则促进5-LOX表达上调,并较单药组更大程度降低p-AKt蛋白表达。