【摘 要】
:
目的:通过组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI)PXD101对口腔鳞癌细胞HN-6进行干预,检测药物对HN-6细胞在增殖、细胞凋亡和细胞周期方面的影响效果。 方法:HN-6细胞放于含有10%的
论文部分内容阅读
目的:通过组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI)PXD101对口腔鳞癌细胞HN-6进行干预,检测药物对HN-6细胞在增殖、细胞凋亡和细胞周期方面的影响效果。 方法:HN-6细胞放于含有10%的胎牛血清,1%双抗(青霉素100 U/mL和链霉100μg/mL)的DMEM细胞培养液里,放入到5%CO2,37□C细胞培养箱里。每天用倒置显微镜进行观察,待细胞长满瓶底的80%-90%用胰酶消化传代一次。 将HN-6细胞接种于96孔板中,用不同浓度的PXD101药液对其进行干预。分别在24 h、48 h、72 h倒置相差显微镜下观察细胞形态、大小、数量及贴壁等情况,并进行拍照。将对数生长期的细胞常规接种于3块96孔板,置于37℃,CO2培养箱中进行孵育24 h。用DMSO将药物的浓度梯度调整为0.01、0.1、0.5、1、10μmol/L,对其进行作用,24、48、72 h后加入MTT液,震荡10min,将酶标仪波长设置为490nm,进行检测并读取吸光度。细胞常规培养,置入37℃,CO2培养箱中继续培养。24 h后取出培养瓶,加入PXD101进行干预,24、48 h收集细胞,调整细胞密度,1000转离心10 min,弃除上清液,PBS洗涤,将细胞重悬于BindingBuffer,再加入AnnexinⅤ-FITC轻轻混匀,避光室温反应15分钟,加入300μl Binding Buffer,加入5μl PI避光染色15 min,流式细胞仪上测定每个样品的凋亡细胞比率。细胞常规培养,24 h后加入不同浓度的PXD101进行干预,37℃、CO2培养箱中孵育24小时后收集细胞,1000转离心10 min,预冷PBS洗涤,70%乙醇,4℃固定24 h后收集细胞,加PI染液,避光孵育30 min,上机检测。 结果:PXD101可明显抑制HN-6细胞的生长,呈时间剂量依赖性。 在镜下我们能够观察到对照组的细胞处于贴壁状态,呈现多边形的外形,生长状况活跃;而药物处理组细胞脱壁,变小,细胞核皱缩。绘制细胞生长曲线示,随着PXD101的浓度和作用时间的增加,HN-6细胞生长明显受到抑制,各实验组细胞生长抑制率与对照组比较。1μmol/LPXD101作用24 h,48 h细胞总凋亡率分别为20.9%、38.6%;HN-6细胞周期阻滞于G0/G1期。 结论: PXD101体外实验能显著抑制人口腔舌癌HN-6的细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期停滞在G0/G1期。
其他文献
龋病是一种细菌感染性疾病,控制致龋菌和牙菌斑,是预防龋病发生的有效途径.目前主要是使用机械性措施和化学方法控制菌斑,化学方法防龋有一定的局限性.近年来,从天然动植物中
摘要:本文介绍了在高职院校中做好工科专业的班主任管理工作的几个要点,针对工科学生的特点,在激发学生学习兴趣、培养职业素质、锻炼个人能力等方面提出了见解。 关键词:高职;工科专业;班主任 【中图分类号】G635.1 新形势下,高职教育越发体现了其重要价值和地位。班主任是工作在教育第一线的人员,与学生有着广泛而密切的接触。而对于工科类专业的学生,又自有其区别于文科专业的特点。如何管理好工科类专业
摘 要:西南林业大学是云南省率先开设公选课的高校,多年教学管理取得一定的成绩,亦产生一系列问题。课程建设缺少规划、课程管理与监控体系缺失或流于形式、教材资料缺乏、教师的教学水平相对一般是目前林业类综合大学公选课课程体系面临的通用性问题,根据专业培养优化公选课模块、建立公选课教学建设的长效机制、建立严格的公选课课程准入制度、合理选用公选课教材、强化教学监督及考核、教学内容要独特新颖是统筹规划公选课课
牙釉质是一种复杂的生物材料,其中96%(质量分数)以上由羟基磷灰石(hydroxyapatite, HAP, Ca10(PO4)6(OH)2)晶体构成,有机物约占1%[1]。在牙釉质发育过程中,成釉细胞分泌的釉原蛋白(am
该文目的在于研究龋病发展进程中,免疫活性细胞在牙髓免疫防御机制中的重要作用,为临床上合理选择保存髓的时机及筛选优良的药物提供理论基础和实验室依据.取正常和龋环的第
目的:口腔癌的早期诊断是防治口腔癌的关健.寻找早期、特异性高且敏感的肿瘤标记物是监测口腔癌前病变的关键.近年来,随着基础医学的发展,使得在口腔癌的分子诊断方面发迅速.
1.目的:用三维有限元法分析两颗相同基台高度的种植体采用单冠修复与联冠修复时,种植区骨组织Von Mises等效应力值及应力分布的变化,探讨单冠修复与联冠修复对种植区骨组织应力
摘要“新能源汽车技术专业”的设置是密切联系区域经济发展状况及人才需求状况的结果,是高职高专教育与社会需求的结合点,是以服务为宗旨,以就业为导向的高等职业教育重要体现,也是学校教学工作主动、灵活地适应社会需求重要表现。专业教学计划则是在以对职业能力的分析与分解为基础,以优化人才培养模式为目标,处理好了知识与能力的关系等的原则下设计制定并形成了自己独有的特色。 关键词新能源汽车技术专业;专业设置;教
目的:通过研究平阳霉素局部注射后面神经的电生理学及神经和腮腺组织的组织学变化,探讨这些组织损伤的动态修复过程,为临床工作提供一定的理论依据.材料和方法:选用15只日本
西野瑠美子与朴永心她叫朴永心,是一位朝鲜人,当年的日军“慰安妇”。为她如今敢于挺身而出的精神所打动,2002年初,《现代快报》记者穿行于南京的大街小巷,找寻当年的日军慰