【摘 要】
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邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)是一种由苯酐和异壬醇酯化反应而得的常用增塑剂,广泛用于聚氯乙烯聚合物(PVC)等塑料产品中,代替了由于生殖毒性而禁止使用其它增塑剂来合成的塑料消
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邻苯二甲酸二异壬酯(DINP)是一种由苯酐和异壬醇酯化反应而得的常用增塑剂,广泛用于聚氯乙烯聚合物(PVC)等塑料产品中,代替了由于生殖毒性而禁止使用其它增塑剂来合成的塑料消费产品。某些邻苯二甲酸盐若在孕期染毒,会造成胎儿时期睾丸发育不全的相关综合征。但是,DINP对胎儿时期Leydig细胞的发育是否有影响尚不清楚。 目的: 调查DINP对大鼠胎儿的胎儿型睾丸Leydig细胞功能和睾丸发育的影响。 方法: 对雌性妊娠Sprague Dawley(SD)大鼠从孕期(GD)第12-21天分别灌胃给予10、100、500或1000毫克/千克(mg/kg)的DINP和玉米油(溶媒对照)。GD21.5天,即在仔鼠出生第一天,处死仔鼠。测量母鼠GD0天、GD11天和分娩后的体重;测量雄仔鼠的肛殖距(AGD)及雄仔鼠的体重;取出雄仔鼠的睾丸,对睾丸进行冰冻切片及酶学染色,计算睾丸的体积、胎儿型Leydig细胞的数目、细胞大小、胎儿型Leydig细胞的聚集情况;用放射免疫技术检测胎儿睾丸中的睾酮水平;应用实时定量PCR(qPCR)技术,检测胎儿型Leydig细胞相关基因[胰岛素样因子3(Ins13)、促黄体生成素受体(Lhcgr)、低密度胆固醇受体(Scarb1),急性胆固醇合成调节蛋白(Star)、胆固醇侧链裂解酶(Cyp11a1)、17α-羟化酶/17,20裂解酶(Cyp17a1)、3β-羟基类固醇脱氢酶1(Hsd3b1)和17β-羟基类固醇脱氢酶3(Hsd17b3)]的表达情况;通过对睾丸的组织芯片结合半定量免疫组化染色,对胎儿型Leydig细胞相关蛋白(INSL3、CYP11A1和HSD3B1)的表达进行检测。 结果: DINP灌胃后可以显著降低仔鼠体重;DINP对胎儿型Leydig细胞聚集的最低可见有害作用剂量水平(LOAEL)为10mg/kg,并剂量依赖地引起了胎儿型Leydig细胞聚集;造成大鼠胎儿睾丸中精原细胞多核化,DINP的LOAEL为100 mg/kg;10 mg/kg DINP显著增加胎儿型Leydig细胞大小,但降低INSL3和HSD3B1基因的表达和蛋白水平;1000 mg/kg剂量的DINP也降低了睾丸中睾酮的水平。 结论: DINP孕期染毒会诱导胎儿型Leydig细胞聚集、降低Leydig细胞中类固醇合成的相关基因表达水平、降低睾酮水平和以及导致精原细胞多核化,从而造成胎儿型Leydig细胞功能障碍和睾丸发育不全。
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