目的:通过超声辅助水蒸气蒸馏法优化竹叶椒挥发油提取工艺,对本实验提取的竹叶椒鲜果挥发油进行体内镇痛抗炎药效试验,并通过网络药理学方法及体外实验探讨其镇痛抗炎作用机制。方法:采用响应面法,以挥发油提取率为评价指标,考察超声时间、料液比、蒸馏时间三个因素最佳水平,确定竹叶椒挥发油的最佳提取工艺;采用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）,分析鉴定竹叶花椒挥发油中化学成分;用热板法和醋酸扭体法研究竹叶椒挥发油部位的镇痛药理活性,以二甲苯致小鼠耳肿胀为模型,观察竹叶椒挥发油部位的抗炎作用;通过各数据库平台收集竹叶椒挥发油成分,炎症与疼痛的相关靶点所对应靶点,运用Cytoscape 2.7.2软件构建“竹叶椒挥发油化学成分-靶点-疾病”网络模型,利用相关数据库分析蛋白靶点相互作用与组织分布,并对作用靶点进行基因本体论（gene ontology,GO）功能及京都基因及基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析;最后采用分子对接法验证竹叶花椒挥发油主要化学成分与核心靶点的相互作用,并通过COX-2酶抑制剂筛选试剂盒进行体外验证。结果:竹叶椒挥发油最佳提取工艺为:超声时间40 min,料液比1:20,蒸馏时间90 min;从竹叶椒挥发油中鉴定化学成分44个;竹叶椒挥发油高、中、低剂量组对小鼠热板致痛、扭体及耳肿胀反应均具有抑制作用,与模型组相比较均具有显著性差异。预测得到竹叶椒挥发油潜在抗炎镇痛靶点78个,关键靶点涉及前列腺素内过氧化物合成酶2、毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型3、过氧化物酶体增殖物激活受体α、大麻素受体2等。GO分析结果表明筛选靶点主要涉及RNA聚合酶II启动子转录的正调控、质膜及酶结合等生物学过程。KEGG通路富集分析得到60条信号通路,涉及神经活性配体-受体相互作用、5-羟色胺能突触及胰岛素抵抗等相关通路。分子对接结果显示竹叶椒挥发油中芝麻素、胆甾烯基豆蔻酸酯、β-花柏烯和金合欢醇等成分与核心靶蛋白具有较好的亲和能力,同时竹叶椒挥发油和其中芝麻素、金合欢醇单体均能抑制COX-2酶活性。结论:综上所述,通过超声辅助水蒸气蒸馏法提取竹叶椒鲜果挥发油,工艺过程简单,其蒸馏时间减少且产率有所提高,所提取的竹叶椒鲜果挥发油成分多样复杂,具有显著体内镇痛抗炎活性,并且竹叶椒挥发油及其中芝麻素、金合欢醇单体等多种成分与核心靶蛋白具有较好的亲和能力,可能通过抑制COX-2靶点,从而发挥其抗炎镇痛作用。