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目的：研究单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)对人脐静脉内皮细胞(hUVECs)生长的影响、可能机制及金雀异黄素的干预作用。
方法：1.培养并鉴定人脐静脉内皮细胞。2.用不同浓度单核细胞趋化蛋白-1(0.1ng/ml,1.0ng/ml，10ng/ml，100ng/ml)对其作用24h、48h；先用MTT比色法观察细胞存活率、流式细胞技术检测细胞DNA含量及细胞周期观察其hUVECs生长的影响，琼脂糖凝胶电泳检测细胞染色体“DNAladder”的形成、AnnexinV/PI双染细胞流式细胞仪观察内皮细胞凋亡；流式细胞技术及Western印迹法检测凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2、Bax的表达，探讨MCP-1诱导hUVECs凋亡的可能机制。3.选择单核细胞趋化蛋白-1对hUVEC凋亡作用效果较明显的剂量组加入不同浓度的金雀异黄素(0.1μmol、1μmol、10μmol、50μmol)作用24h，观察其对单核细胞趋化蛋白-1诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的干预作用及对Bcl-2、Bax、Fas表达的影响。
结果：1.胶原酶灌注消化收集细胞，胰蛋白酶—EDTA混合液消化传代可以获得满意的hUVECs，vWF和KDR染色证实培养细胞为内皮细胞。2.单核细胞趋化蛋白-1能诱导人脐静脉内皮细胞的凋亡(P＜0.05/P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)，其效应随浓度和时间的增加而增强：MTT明显减低；细胞DNA含量减少，出现亚G0/G1峰(凋亡细胞峰)；AnnexinV/PI显示凋亡细胞明显增加；细胞DNA呈明显的“DNAladder”；MCP-1抑制Bcl-2的表达，促进Fas、Bax的表达。3.金雀异黄素抑制单核细胞趋化蛋白-1诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡，抑制效应随剂量增加而增强(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.01)。与对照组比较(10ng/mlMCP-1)，MTT明显增加；凋亡细胞明显减少，Bcl-2表达明显增加，Fas、Bax表达明显降低。
结论：单核细胞趋化蛋白-1能诱导人脐静脉内皮细胞凋亡，其作用机制可能与上调Bax、Fas蛋白及下调Bcl-2蛋白表达有关；金雀异黄素能抑制单核细胞趋化蛋白-1诱导的人脐静脉内皮细胞的凋亡，抑制作用有量效相关性，抑制机制可能与下调Fas、Bax蛋白及上调Bcl-2蛋白的表达有关。