鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus, CAV)是引起鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)的病原,属圆环病毒科(Circoviridae)。CAV基因组编码三种蛋白:VP1(51.6kD)、VP2(24kD)和VP3(13.6kD),其中VP3(Apoptin)可以诱导细胞凋亡。本文通过基因突变技术将CAV的基因序列第487nt处的T改变为C,第526nt处的C改变为T,从而使VP3的起始密码子移位到原第14氨基酸的位置。突变后的VP3缺失了39个碱基,造成VP3的不完全表达;而相同碱基位置的VP2编码的氨基酸不变,因此不会影响VP2的表达。本研究还通过引物设计,将CAV病毒非编码区不完整的EcoR I识别序列(5’-GACTTC-3’)突变为完整的EcoR I识别序列(5’-GAATTC-3’),从而有利于CAV基因组的体外自身环化。将体外自身环化的重组体转染MDCC-MSB1细胞,获得感染性克隆。为下一步研究其对病毒致病性的影响,研制弱毒性或无毒性的CAV疫苗株探索一条新路。环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术通过具有链置换特性的Bst DNA聚合酶完成靶序列的扩增,仅需恒温加热就能扩增DNA,并可以通过核酸染料染色观察结果,具有简便、快速的特点。本研究利用鸡传染性贫血病毒Cux-1株基因为靶序列设计了6条引物并建立了LAMP检测方法,以琼脂糖凝胶电泳观察扩增产物的方法对反应体系及反应条件进行了优化,并对反应的特异性、灵敏度进行了检测。结果表明环介导等温扩增检测技术(LAMP)是诊断鸡传染性贫血病感染的简单快速方法,其敏感性可达10个拷贝,并且具有良好的特异性。实际应用表明,该方法应用方便、快速、其敏感性可以满足相关样品的检测需要。