鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,简称RA)感染是危害全世界野生水禽和火鸡、家鸭、鹅的一种主要疾病。当鸭疫里默氏杆菌与其他微生物混合感染时能造成严重的经济损失。该病发病率和死亡率通常在10～30%,但有的鸭场感染鸭疫里默氏杆菌的病鸭死亡率高达75%,一旦某地区的鸭群、鹅群发生鸭疫里默氏杆菌感染,该病就会成为地方性疾病,很难彻底根除,并且经常反复爆发。鸭疫里默氏杆菌感染以全身渗出性浆膜炎为主要病理特征,在病理学上很难与禽巴氏杆菌感染、大肠杆菌感染、链球菌感染和沙门氏菌感染进行区别。鸭疫里默氏杆菌根据表型特征、生化特征和分子生物学特征进行鉴定和分类。到目前为止,国际上报道鸭疫里默氏杆菌共有21个血清型。本研究对来自广东地区疑似鸭疫里默氏杆菌感染的病鸭组织进行了病原菌的分离培养和生化鉴定,确定得到20株鸭疫里默氏杆菌,动物回归试验结果表明分离的鸭疫里默氏杆菌具有很强的致病性。对20株鸭疫里默氏杆菌进行药敏试验,结果显示分离株已广泛产生耐药性。通过对20株分离株的血清型鉴定,结果表明当前广州地区鸭疫里默氏杆菌的流行血清型为10型,占分离菌总数的75%。参照已发表的鸭疫里默氏杆菌15型CVL110/89株编码42kDa主要外膜蛋白A(Outer Membrane Protein A,OmpA)的基因序列,本研究在其208～227和997～1017碱基位设计一对扩增片段长度为809bp的引物(Primer1和2),同时针对鸭疫里默氏杆菌16S rDNA基因序列,在其508～526和824～843碱基位设计一对特异引物(Primer3和4),扩增334bp片段,以细菌全菌体为模板建立双重PCR方法,结果均能扩增出两条目的片段,经测序证实为鸭疫里默氏杆菌,而对鸭源大肠杆菌、鸭源禽多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门氏菌和鸭源葡萄球菌的扩增结果均为阴性,说明建立的双重PCR方法能快速、准确的检测出鸭疫里默氏杆菌,并具有高度特异性,可用于鸭疫里默氏杆菌的快速鉴定和快速诊断。本研究根据GenBank中已发表的鸭疫里默氏杆菌的OmpA基因序列,在其高度保守区设计一对特异性引物,应用PCR技术,分别扩增从中国广东、福建和山东等地分离的8株鸭疫里默氏杆菌中国分离株的OmpA基因,克隆测序后与GenBank中已发表的26个鸭疫里默氏杆菌进行序列比较,结果表明:所有菌株的OmpA基因均为由1164个碱基组成的ORF,编码387个氨基酸组成的蛋白质,起始密码子均为ATG,终止密码子均为TAA,其核苷酸序列非常保守,同源性高达88.2%～100%,氨基酸同源性达到88.9～100%。试验表明,OmpA基因具有种内相对保守性,其核苷酸与氨基酸同源性与鸭疫里默氏杆菌的血清型、分离时间和地点之间无必然联系。