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目的本项目以川芎嗪为模型药物，采用可生物降解的高分子材料，将川芎嗪制备成合适的可转形穴位注射药线，使该药线具有在室温下为液体状，在体内形成半固体凝胶状的特性。选取脑缺血再灌注大鼠，将大椎及双侧内关进行穴位埋可转形穴位注射药线的治疗，并与相同穴位埋川芎嗪胶原药线和川芎嗪药物羊肠线作比较。采用免疫组化的方法观察治疗后大鼠脑皮质区增殖细胞核抗原（PCNA）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的调节作用。方法本研究参照前人实验研究，采用正交设计法，将壳聚糖混合物、无水磷酸氢二钾和川芎嗪按一定比例混合制备成可转形穴位注射药线，并研究该药线埋入家兔穴位后，在其体内的释放程度以及该药线对大鼠脑皮质区PCNA、Caspase-3的影响。⑴可转形穴位注射药线在体内释放度的测定：选用健康家兔，将川芎嗪药物羊肠线、川芎嗪胶原药线以及可转形药物羊肠线按一定剂量埋入家兔内关、大椎穴，用高效液相色谱法（HPLC），测定家兔不同时段的血药浓度，将三种药线进行比较，评估各组药线的体内释放性能。⑵可转形药线对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区PCNA和Caspase-3的影响的实验研究：选用健康Sprague-Dawley（SD）大鼠40只，随机分为4组，每组10只大鼠，分别是模型组，可转形穴位注射药线组，川芎嗪药物羊肠线组和川芎嗪胶原药线组。采用改良线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型（MCAO），在大鼠大椎、双侧内关进行穴位埋药线处理。在最后观察日24h后采用心脏灌注技术断头取脑，固定于4%多聚甲醛溶液中6-8h,进行石蜡包埋，用免疫组化法测定大鼠脑皮质区PCNA、Caspase-3的表达，并采用HPIAS-1000计算机高清晰彩色图像分析仪对切片进行图像分析，所得数据进行统计学处理。结果1.可转形穴位注射药线在体内释放度的测定：高效液相色谱法（HPLC）法，测定家兔血药浓度药物羊肠线组在28h后达到最大值，随后逐渐下降；胶原药线组在24h后释放值达到高峰，随后逐渐下降；可转形药线组在22h后释放值达到最高值，随后逐渐下降，32h后仍有释放表达。2.免疫组化检测实验结果显示：模型组大鼠脑皮质区Caspase-3阳性细胞明显增多，有少量PCNA表达，可转形穴位注射药线组、川芎嗪药物羊肠线组、川芎嗪胶原药线组同时与模型组比较，对Caspase-3、PCNA表达的影响有显著性差异（P<0.05）；其中，可转形穴位注射药线组降低Caspase-3、升高PCNA蛋白表达的效果明显优于后两组（P<0.05）；后两组同时比较，无显著性差异（P＞0.05）。结论1.可转形穴位注射药线在体内释放在大鼠体内释放时间教缓慢，有较好的缓释效果。2.可转形穴位注射药线可上调PCNA，下调Caspase-3，从而减少脑缺血所造成的损伤。可转形穴位注射药线对PCNA、Caspase-3的影响明显优于川芎嗪药物羊肠线和川芎嗪胶原药线，这与可转形穴位注射药线的缓慢释放药物的特性密切相关。