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大黄酚(Chrysophanol,Chry)是大黄中提取的蒽醌类化合物,具有抗菌,兴奋神经,麻痹肌肉,抗癌,利尿及较明显的止咳作用。大黄酚能改善记忆障碍,提高抗缺氧能力和耐力,具有明显的抗衰老作用。但由于大黄酚在水中的溶解度低,性质不稳定,且直接用药时对胃肠有刺激作用,限制了其进一步的临床应用。目前,国内外尚无临床注射用大黄酚剂型的报道,因此,研究制备一种可以应用于临床的大黄酚剂型,不仅可以提高大黄酚的药用价值,也可为多种中药有效成分新剂型研究拓展思路,为更多中药单体应用于临床的研发奠定基础。纳米囊化技术是近年来发展起来的一种药物制剂技术,通过将药物纳米微囊化不但可以提高药物在水中的溶解度,降低药物的毒副作用,提高疗效,而且还可以根据其粒径的大小在体内分布不同实现靶向或定向给药。聚氰基丙烯酸丁酯载药纳米囊具有生物相容性、器官靶向性、无毒性、抗菌性、制剂的稳定性和能用于静脉注射等诸多优点。因此我们用界面聚合法制备了大黄酚聚氰基丙烯酸丁酯纳米囊(nanocapsules loading with Chrysophanol by Polybutylcyanoacrylate,Chry-PBCA-NC)的混悬液,进行药代动力学研究,观察其在动物体内的代谢和分布特点;为了提高其稳定性,又将混悬液冷冻干燥制备成Chry-PBCA-NC冻干粉,并考察其稳定性和体外释放度,以期得到一种稳定的能够静脉注射给药的大黄酚新剂型,提高大黄酚的脑组织靶向性以更好的发挥脑部治疗作用。1 Chry-PBCA-NC混悬液的制备和质量研究采用单因素法筛选制备工艺,选择最佳的油相溶剂和搅拌时间。在此基础上,以包封率为指标,采用正交设计法L9(34)对处方进行筛选,以优化制备工艺,并对其进行包封率、粒径和粒度分布测定等的质量研究。研究证明,最佳工艺以丙酮为大黄酚的油相溶剂,搅拌时间为2 h。大黄酚投药量为5 mg时,搅拌速度为800 r ? min-1,水相pH值为2,α-BCA用量为13μl,乙酸乙酯用量为0.6 ml。Chry-PBCA-NC混悬液平均包封率为82.19%,平均粒径为246 nm,电镜照片显示粒度分布均匀。研究结果提示,采用界面聚合法制备Chry-PBCA-NC混悬液具有较高的包封率,粒径小且粒度分布均匀,方法简便,制备工艺稳定可行,且重复性良好。2 Chry-PBCA-NC混悬液的药代动力学研究我们分别采用家兔和小鼠两种动物对Chry-PBCA-NC混悬液进行药代动力学研究。2.1家兔的药代动力学研究给予家兔静脉注射大黄酚对照品溶液或Chry-PBCA-NC混悬液,测定不同时间点大黄酚的血药浓度,所得药物浓度数据用3P97程序拟合,获得最佳房室模型和药代动力学参数。结果显示,大黄酚对照品和Chry-PBCA-NC混悬液在家兔体内的药物代谢都符合二室开放模型,在药物剂量范围内两者都表现出线形动力学过程,两者的t1/2(β)分别为9.0968和20.2507。研究结果提示,将大黄酚制备成Chry-PBCA-NC混悬液后并未改变药物的体内代谢过程,但能在体内停留更长的时间从而发挥更长的药效。2.2小鼠的药代动力学研究给予小鼠尾静脉注射大黄酚对照品溶液或Chry-PBCA-NC混悬液,并测定给药后不同时间点小鼠各组织中大黄酚的含量,用Origin7.5软件处理数据,求得各组织分布曲线的AUC值,进而计算靶向指标。结果显示:Chry-PBCA-NC混悬液与大黄酚对照品组在脑组织中的峰浓度比Ce值为4.7439,靶向效率te值为1.1234,在脑中的相对摄取率re值为3.6284 ,相对总靶向效率RTE值为2.1884。研究结果提示,与大黄酚对照品比较,Chry-PBCA-NC混悬液具有显著的脑组织靶向性。3 Chry-PBCA-NC冻干粉的制备Chry-PBCA-NC混悬液虽然可以作为临床制剂应用,但是运输贮存不方便,长时间放置易影响药效,因此,我们尝试采用冷冻干燥法将Chry-PBCA-NC混悬液制备成Chry-PBCA-NC冻干粉,并测定其载药量。结果显示,Chry-PBCA-NC冻干粉的平均载药量为21.48%,研究结果提示,冻干制备工艺可行。4 Chry-PBCA-NC混悬液及其冻干粉的稳定性研究比较研究大黄酚对照品、Chry-PBCA-NC混悬液和Chry-PBCA-NC冻干粉的光稳定性、热稳定性和湿稳定性。结果显示,三者总体的降解率为对照品>混悬液>冻干粉。研究结果提示,Chry-PBCA-NC混悬液的稳定性比大黄酚对照品显著增加,将其冷冻干燥成冻干粉后稳定性更加明显。5 Chry-PBCA-NC混悬液及其冻干粉的体外释放度研究采用动态透析技术研究Chry-PBCA-NC的体外释药性能,选用0.5%的十二烷基硫酸钠溶液(SDS)为释放介质,在释放过程的不同的时间点取样,比较三者的体外释放度。结果显示:Chry-PBCA-NC混悬液和冻干粉水溶液的体外释放达平衡时间明显延长。研究结果提示,Chry-PBCA-NC有良好的缓释作用。综上所述,经正交设计法筛选制备工艺,采用界面聚合法制备的Chry-PBCA-NC混悬液,包封率高,粒径小,粒度分布均匀;药代动力学实验显示Chry-PBCA-NC混悬液在动物体内为二室开放模型,消除时间长,并有良好的脑组织靶向性,可作为大黄酚的临床剂型应用。为了解决储存运输的不便和用药的安全性,将Chry-PBCA-NC混悬液制备成Chry-PBCA-NC的冻干粉,经研究发现其光、热和湿稳定性均良好,体外释放实验显示其具有良好的缓释作用,但其大批量制备工艺尚不稳定,需进一步研究。