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本研究对牛体细胞核移植的有关影响因素进行了系统研究。当电场强度为100 v／mm，电脉冲2次时，脉冲时间为10μs的颗粒细胞和成纤维细胞的融合率(46.4％和50.3％)显著高于30μs的融合率(26.0％和35.0％，P＜0.05)，囊胚发育率(11.8％和10.2％vs 5.3％和3.3％)差异不显著。颗粒细胞融合法核移植的分裂率(73.6％)高于直接注核法(55.3％，P＜0.05)，而成纤维细胞直接注核法核移植的分裂率(70.4％)又高于电融合法(55.5％，P＜0.05)，但颗粒细胞和成纤维细胞直接注核法的总囊胚率(10.2％和11.2％)均显著高于电融合法(4.4％和3.0％，P＜0.05)。血清饥饿培养处理可提高颗粒细胞直接注核成功率(90.2％vs 75.9％，P＜0.05)，但降低成纤维细胞直接注核后重组胚的分裂率(68.5％vs 81.3％，P＜0.05)，对两种细胞的其它各项指标没有显著影响。在耳部成纤维细胞的注核液滴中添加7％的乙醇可提高重组胚的分裂率(80.9％vs 65.5％，p＜0.05)。TⅡ期去核卵母细胞的颗粒细胞核移植融合率显著低于MⅡ期去核的卵母细胞(29.2％vs42.9％，P＜0.05)，颗粒细胞和成纤维细胞的合计总囊胚率(2.8％)也低于MⅡ期去核的卵母细胞(9.1％，p＜0.05)。成纤维细胞直接注核后3h用离子霉素(51μol/L5min)和DMAP(2mmol／L，3h)激活处理的重构胚囊胚发育率(14.0％)显著高于注核后0h(7.4％)和6h(4.8％，P＜0.05)激活的重构胚。 以上结果表明：(1)牛颗粒细胞和耳部成纤维细胞核移植的适宜电融合参数为100 v／10μs，10μs，电脉冲2次；(2)耳部成纤维细胞和颗粒细胞直接注核的核移植效果优于电融合法；(3)血清饥饿培养处理供体细胞没有必要；(4)供体细胞的预激活可提高核移植效果：(5)TⅡ期去核卵母细胞的核移植效果不如MⅡ期去核的卵母细胞；(6)供体细胞核与受体卵母细胞激活前的胞质因子互作一段时间，有利于核移植胚胎的发育。 在二十世纪九十年代末，随着世界上第一只体细胞克隆绵羊“Dolly”的诞生，宣告成年哺乳动物体细胞核移植进入了崭新的时代。随后在小鼠、牛、山羊等动物中也获得了成功。但是，从现有的文献资料中可以发现，成年哺乳动物体细胞核移植技术的总效率很低下，仅为1～6％(石德顺等，1998)，离实际推广应用还有相当距离。因此，很有必要对受体胞质的选择及去核方法，供体细胞的选择与调控，以及核移植胚胎的激活和培养等相关的技术环节进行进一步深入的研究，以提高核移