目的：研究脾阳虚、脾阴虚模型大鼠及补脾方药干预后大鼠一般状况、唾液流率、唾液渗透压、颌下腺水通道蛋白(AquaPorins，AQPs)及VIP-cAMP-PKA信号通路的变化，从水液代谢角度，探索脾与唾液相关的内在分子机制，揭示“脾在液为涎”理论的科学内涵，为中医脾藏象理论的现代化研究提供客观依据，为临床开展脾虚相关疾病的唾液微观辨证、无创伤诊疗技术及其防治奠定基础。
　　方法：根据“劳则气耗”及“脾主运化”等理论，通过疲劳过度(跑步机跑步至耐力极限)加饮食不节(双日喂饲精炼猪油脂，单日喂甘兰，禁食)复合因素制作脾气虚证模型，在脾气虚证的基础上用番泻叶水浸液灌胃造成脾阳虚证，用番泻叶水浸液再加甲状腺片悬浊液灌胃造成脾阴虚证，从而建立脾阴虚和脾阳虚证动物模型；造模成功后脾阳虚用药组以附子理中汤灌胃治疗，脾阴虚用药组以慎柔养真汤灌胃治疗。观察并记录各组大鼠的一般情况，检测大鼠的唾液流率、唾液渗透压、颌下腺中AQP1、AQP2、AQP5、VIP、cAMP、PKA等相关指标的变化，探讨脾与涎相关的内在分子机制。
　　结果：①各组大鼠一般状况比较：造模期间，脾阳虚模型组大鼠出现腹泻、喜卧、怕冷等症状，与脾阳虚证候判断依据相符。脾阴虚模型组大鼠出现腹胀食少，毛色无泽，活动增多，烦躁不安的症状，与脾阴虚证候判断依据相符。用附子理中汤和慎柔养真汤药物干预后，附子理中汤组大鼠腹泻、喜卧、怕冷等症状均得到改善，慎柔养真汤组大鼠毛色无泽，活动增多，烦躁不安等症状均得到改善。第2周和第5周，与正常对照组相比，脾阳虚和脾阴虚模型组体重均下降，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阳虚模型组相比，脾阴虚模型组体重较轻，但无统计学差异(P＞0.05)。第8周，与脾阳虚模型组相比，脾阴虚模型组体重较轻，但无统计学差异(P＞0.05)，与脾阳虚模型组比较，附子理中汤组体重增加，有显著性统计学差异(P＜0.01)；与脾阴虚模型组比较，慎柔养真汤组体重增加，有显著性统计学差异(P＜0.01)。②各组大鼠唾液流率检测结果：与正常对照组相比，脾阳虚和脾阴虚模型组唾液流率下降，有显著的统计学差异(P＜0.01)；与脾阳虚模型组相比，脾阴虚模型组唾液流率较高，有显著统计学差异(P＜0.01)，与脾阳虚模型组相比，附子理中汤组唾液流率上升，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阴虚模型组比较，慎柔养真汤组唾液流率上升，有显著统计学差异(P＜0.01)。③各组大鼠唾液渗透压检测结果：与正常对照组相比，脾阳虚和脾阴虚模型组唾液渗透压均下降，有显著的统计学差异(P＜0.01)；与脾阳虚模型组相比，脾阴虚模型组唾液渗透压较高，但无统计学差异(P＞0.05)，与脾阳虚模型组相比，附子理中汤组唾液渗透压升高，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阴虚模型组比较，慎柔养真汤组唾液渗透压升高，有显著统计学差异(P＜0.01)。④各组大鼠颌下腺病理组织形态变化：正常对照组大鼠颌下腺腺泡形态规则、排列整齐，导管形态明显。与正常对照组比较，脾阳虚和脾阴虚模型组颌下腺腺泡体积萎缩、数量减少，导管管腔扩张。与脾阳虚和脾阴虚模型组相比，附子理中汤组和慎柔养真汤组颌下腺腺泡体积增大、数量增多。⑤各组大鼠颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5蛋白表达免疫组化检测结果：在颌下腺组织中，AQP1、AQP2、AQP5蛋白多表达于腺泡、导管上皮细胞胞膜及胞质。与正常对照组比较，脾阳虚和脾阴虚模型组AQP1、AQP2、AQP5蛋白表达数量及面积均减少，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阳虚模型组相比，脾阴虚模型组AQP1蛋白表达较高、AQP2蛋白表达较低，但无统计学差异(P＞0.05)，脾阴虚模型组AQP5蛋白表达较低，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阴虚模型组相比，慎柔养真汤组AQP1、AQP2、AQP5蛋白阳性表达均显著增加，与脾阳虚模型组相比，附子理中汤组阳性表达增加，有显著统计学差异(P＜0.01)。⑥各组大鼠颌下腺组织中AQP1、AQP2、AQP5蛋白表达免疫印迹检测结果：与正常对照组比较，脾阳虚和脾阴虚模型组大鼠颌下腺组织AQP1、AQP2、AQP5表达均降低，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阳虚模型组相比，脾阴虚模型组AQP1、AQP5表达较低，有显著统计学差异(P＜0.01)，AQP2表达较低，但无统计学差异(P＞0.05)；与脾阳虚模型组比较，附子理中汤组AQP1、AQP2、AQP5表达均升高，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阴虚模型组比较，慎柔养真汤组AQP1、AQP2、AQP5表达均升高，有显著统计学差异(P＜0.01)。⑦酶联免疫分析检测VIP、cAMP、PKA：与正常对照组比较，脾阳虚和脾阴虚模型组VIP、cAMP、PKA浓度均降低，具有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阳虚模型组相比，脾阴虚模型组VIP、PKA浓度增高，cAMP浓度降低，但均无统计学差异(P＞0.05)；与脾阳虚模型组比较，附子理中汤组VIP、cAMP、PKA浓度均升高，有显著统计学差异(P＜0.01)；与脾阴虚模型组比较，慎柔养真汤组VIP、cAMP、PKA浓度均升高，有显著统计学差异(P＜0.01)。
　　结论：与正常对照组大鼠比较，脾阳虚和脾阴虚模型组大鼠生长发育情况、颌下腺形态均发生了改变，唾液流率、唾液渗透压、AQP1、AQP2、AQP5表达及VIP、cAMP、PKA浓度等均呈现了下降的趋势，说明唾液的分泌确实与脾功能的盛衰密切相关，且随着VIP、cAMP、PKA浓度的下降，颌下腺水通道蛋白表达也逐渐减少，唾液流率流率和唾液渗透压均降低，说明不同脾虚状态下，唾液分泌减少、唾液渗透压降低，其发生机制可能与VIP-cAMP-PKA信号通路调控水通道蛋白的表达有关。与脾阳虚模型组比较，除唾液流率、AQP5的平均光密度值、AQP1和AQP5的蛋白表达有统计学意义外，其余指标均无统计学差异。较脾阳虚和脾阴虚模型组大鼠比较，附子理中汤和慎柔养真汤组大鼠颌下腺形态改善，AQP1、AQP2、AQP5表达及VIP、cAMP、PKA浓度较模型组比较均呈现了上升的趋势，说明附子理中汤和慎柔养真汤分别对脾阳虚和脾阴虚模型大鼠唾液分泌有一定的改善作用。