健脾清化法对缺血再灌注大鼠肾损伤的干预作用及机制研究

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目的:(1)健脾清化方立方理论研究(2)观察健脾清化方改善肾缺血再灌注损伤模型大鼠的肾功能及病理改变。(3)从改善氧化应激损伤及炎性反应角度研究并寻找健脾清化方对肾缺血再灌注损伤的预防效果。为临床防治提供理论基础。方法:(1)理论研究:通过对传统医学中关于肾脏病的认识和理论研究找寻并整理健脾清化方的理论基础。(2)实验研究:建立双侧肾动脉结扎诱导的肾缺血再灌注损伤大鼠模型,分别在造模前给予生理盐水、健脾清化方、盐酸罗格列酮预防性用药1周,造模后分别于造模后1h,造模后6h,造模后24h分批测定各组的肾功能、血清SOD、NO、NOS、羟自由基抑制能力,ELISA法测定血清IL-1β、IL-10、TNF-α,Western blot法测定肾组织NF-κB表达水平,肾脏组织进行HE染色,观察各组大鼠的肾脏病理改变。结果:(1)理论研究:脾虚湿热是急性肾IRI在传统医学理论中的重要因素,健脾清化法是预防急性肾IRI的有效办法。(2)实验研究:与正常组相比,三组模型组的BUN、Scr均明显升高(P<0.05),缺血再灌注1h的盐酸罗格列酮组与健脾清化方组BUN、Scr均较模型组水平低,健脾清化方组Scr水平更低(P<0.05)。缺血再灌注6h的盐酸罗格列酮组与健脾清化方组BUN、Scr均较模型组明显降低(P<0.05)。缺血再灌注24h的盐酸罗格列酮组与健脾清化方组BUN、Scr均较模型组显著降低(P<0.05)。三组健脾清化方均优于盐酸罗格列酮。健脾清化方可有效改善肾组织病理变化,与盐酸罗格列酮组间无明显差异。结论:(1)经大鼠背侧双肾夹闭肾动脉方式进行急性肾IRI造模方式易于操作和成功。且急性肾IRI在再灌注24h内持续存在并加重。(2)预防性使用健脾清化方能明显改善急性肾IRI大鼠的肾功能水平,保护肾脏功能,减少急性肾IRI引起的肾功能损伤。(3)预防性使用健脾清化方能明显减少急性肾IRI大鼠的肾脏损伤,能有效改善肾小管损伤等病理损害。(4)健脾清化方保护急性肾IRI的机制可能与增强对ROS的清除能力,同时抑制了炎性因子NK-κB、IL-1β、TNF-α等释放表达有关。(5)急性肾IRI的病理机制可能与NF-κB/TNF-α/IL-1β信号通路有关,健脾清化方可有效抑制这一通路,保护肾功能。(6)急性肾IRI可能存在湿热状态,健脾清化方可能通过清热化湿有效保护肾脏功能。
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