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目的:SBE2(Shh brain enhancer-2,SBE2)作为Shh在下丘脑区域的特异性增强子,其表达与内源性Shh的表达状况相比,SBE2阳性细胞可以特异代表下丘脑Shh表达细胞的分布,通过追踪SBE2阳性细胞,进而可以追踪下丘脑中Sonic hedgehog(Shh)阳性细胞的表达位置及其子代细胞的发育去向。同时构建了SBE2-Cre转基因小鼠,检验其是否可以作为研究基因在下丘脑区域功能的重要工具鼠。方法:在研究中构建了SBE2-Cre转基因小鼠,通过Rosa26-m Tm G报告基因小鼠和SBE2-Cre转基因小鼠交配,获得E10.5,E12.5,E16.5期的小鼠胚胎及P10期的小鼠,通过基因分型,获得Rosa26-m Tm G/SBE2-Cre双阳性小鼠胚胎,将胚胎脑部经过PFA固定,蔗糖沉降,OCT包埋等一系列步骤,切片处理,荧光显微镜下拍照观察,比较各时期SBE2阳性表达区域位置的变化状况。之后将Rosa26-Lac Z报告基因小鼠与SBE2-Cre转基因小鼠交配,获得E10.5,E12.5期Rosa26-Lac Z/SBE2-Cre双阳性胚胎。通过对各时期胚胎进行Lac Z染色,比较SBE2阳性细胞在脑部的分布。为了证明以上结果使用探针提取,胚胎整体原位杂交,切片原位杂交等方法,获得小鼠胚胎脑中Shh阳性细胞的表达位置,进一步证明,对SBE2+细胞进行追踪的结果。结果:SBE2是一段高度保守的序列,作为Shh特异性增强子能够驱动Shh在下丘脑的表达,在调节下丘脑Shh的表达过程中起着关键的作用。研究中构建了SBE2-Cre小鼠,结合Rosa26-m Tm G报告基因小鼠和Rosa26-Lac Z报告基因小鼠对Shh阳性细胞进行了细胞谱系追踪研究。揭示了从小鼠胚胎期到小鼠出生后下丘脑中SBE2阳性细胞的时空表达模式:SBE2在小鼠胚胎脑的视囊(POA)开始表达,沿下丘脑前侧到下丘脑后侧,整个表达区域包含了下丘脑内各种神经核,在腹侧下丘脑有着较强的表达。而且SBE2在下丘脑的表达是一个动态的过程,随位置的变化表达强度也随之发生变化。在小鼠胚胎期到出生后的整个发育阶段,SBE2在各时期的表达略有差别,但总体来说是一个动态且延续的过程。通过SBE2谱系追踪的结论,对比原位杂交后E10.5,E12.5期小鼠胚胎脑部Shh的表达分布,对SBE2示踪的结果给予了有力的支持。结论:SBE2+细胞特异性的代表下丘脑Shh阳性细胞的分布,是作为分化形成下丘脑神经核的主要细胞的来源之一,通过一系列的实验揭示了下丘脑Sonic hedgehog(Shh)阳性细胞及其子代细胞的发育去向。经过对之前的研究讨论可知在下丘脑Shh的表达受多种转录因子共同调控,SBE2同时在各方面对Shh进行调节。且SBE2-Cre小鼠可作为研究基因在下丘脑区域功能的重要工具鼠,这神经发育的研究过程中起到重要作用。