益肾养阴方介导PRMT1调控体系干预系统性红斑狼疮氧化应激损伤的机制研究

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目的:从PRMT1调控体系角度探讨益肾养阴方对系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosu SLE)发病过程可能的干预机制,为益肾养阴方治疗SLE提供依据,丰富中医药防治SLE理论。方法:1.将36只雄性MRL/lpr小鼠随机分为6组(每组6只):模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、激素组、中药配合激素组(联合组)。低剂量组、中剂量组、高剂量组分别予益肾养阴方低、中、高剂量灌胃给药,模型组予生理盐水灌胃,激素组予醋酸泼尼松混悬液灌胃,中药配合激素组予中剂量的益肾养阴方配合醋酸泼尼松混悬液灌胃。4周后心脏取血后处死,分离血清及取其肾组织。以紫外分光光度法检测各组血清中SOD、CAT、MDA含量,Elisa法定量测定血浆抗ds DNA抗体浓度。western blot观测各组肾组织PRMT1、HIF-1a蛋白表达水平,定量RT-PCR检测各组肾组织SP1、SP3、PRMT1、HIF-1a基因表达水平。2.将PRMT1基因表达水平与SP1、SP3、HIF-1a基因表达水平及MDA、SOD、CAT含量进行Pearson相关性分析。结果:1.与模型组比较,益肾养阴方高剂量组、激素组、联合组能降低MRL/lpr小鼠血浆抗ds DNA抗体浓度(P<0.01);治疗各组均能降低MRL/lpr小鼠血清MDA含量(P<0.05,P<0.01),增加血清SOD、CAT含量(P<0.05,P<0.01);益肾养阴方高、中剂量组、激素组、联合组能下调MRL/lpr小鼠肾组织PRMT1、HIF-1a蛋白表达水平;治疗各组均能下调MRL/lpr小鼠肾组织PRMT1、SP1、SP3、HIF-1a基因表达水平(P<0.01)。与激素组比较,联合组(中药配合激素组)能显著减少血清MDA含量(P<0.01),升高血清SOD、CAT的含量(P<0.01),下调PRMT1、HIF-1a蛋白及SP1、SP3、PRMT1、HIF-1a基因表达水平(P<0.05,P<0.01)。2.PRMT1基因表达水平与SP1、SP3、HIF-1a基因表达水平及血清MDA含量呈正相关(0<r<1,P<0.01),与血清SOD、CAT含量呈负相关(-1<r<0,P<0.01)。结论:1.益肾养阴方能降低MRL/lpr小鼠血浆抗ds DNA抗体浓度,下调其肾组织PRMT1、HIF-1a蛋白及PRMT1、SP3、SP3、HIF-1a基因的表达,调控氧化应激标志物SOD、CAT、MDA的含量;2.益肾养阴方通过下调PRMT1表达水平,从而介导SP1/SP3--HIF-1a调控体系,下调SP1、SP3、HIF-1a基因表达水平,增加血清SOD、CAT的含量,减少血清MDA的产生,从而减轻氧化应激损伤,可能为其治疗SLE的作用机制之一。
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