利用全外显子测序技术探寻中国散发型帕金森病致病基因

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背景帕金森病(Parkinson’s Disease,PD)是一种常见的神经系统退行性疾病。目前该病的病因与发病机制尚不完全清楚,多数学者认为PD的发生是遗传与环境因素相互作用的结果,其中遗传因素起着重要作用。随着基因测序技术的迅速发展,具有耗时短、成本低、通量大、对样本量要求不多等特点的全外显子组测序技术(Whole Exome Sequencing,WES)成为现阶段研究疾病遗传学的热点方法。运用WES,学者们可以探寻复杂疾病的罕见突变,从而为疾病的早期分子诊断、预防甚至治疗提供遗传学基础。目的本研究依据2015年美国医学遗传学与基因组学学会(American College of Medical Genetics and Genomics,ACMG)指南,通过对散发型PD患者进行全外显子测序,探寻中国人群散发型PD患者外显子编码区罕见突变基因并进行致病性注释。方法纳入98例中国人群散发型PD患者,进行全外显子测序,依据公共数据库1000 Genomes、gnom AD_exome、esp6500和Ex AC筛选散发型PD患者功能区罕见突变基因并利用公共数据库Clinvar、inter Var、dpsi、db NSFP和HGMD对突变基因进行功能注释。结果共发现14例PD患者出现基因功能区罕见可疑致病性突变。共筛选出6个基因的7个位点突变,包括6个错义突变,1个移码突变。①9例PD患者携带LRRK2基因c.7153G>A:p.G2385R杂合突变;2例PD患者携带LRRK2基因c.2264C>T:p.P755L杂合突变;1例PD患者携带PINK1基因c.1220G>A:p.R407Q杂合突变;1例PD患者携带TRPM7基因c.3337dup T:p.Y1113Lfs*12移码突变;1例PD患者携带DNAJC13基因c.6227G>A:p.R2076Q杂合突变;1例PD患者携带SNCA基因c.158C>T:p.A53V杂合突变;1例PD患者携带GBA基因c.1448T>C:p.L483P杂合突变。②在Clinvar数据库,GBA基因L483P突变体注释的结果为可能致病(Likely pathogenic),而LRRK2基因突变体G2385R和P755L均注释为其他(Other);在inter Var数据库,GBA基因L483P突变体注释的结果为可能致病(Likely pathogenic),而LRRK2基因突变体G2385R和P755L、PINK1基因突变体R407Q、DNAJC13基因突变体R2076Q及SNCA基因突变体A53V均注释为意义不确定(Uncertain significance);在dpsi数据库,DNAJC13基因突变体R2076Q及SNCA基因突变体A53V均注释为高致病性(High),LRRK2基因突变体G2385R为中等致病性(Media),GBA基因L483P突变体、LRRK2基因突变体P755L和PINK1基因突变体R407Q均注释为低致病性(Low);在数据库db NSFP,DNAJC13基因突变体R2076Q、SNCA基因突变体A53V和PINK1基因突变体R407Q均注释为致病性突变(Disease-causing mutation,DM),LRRK2基因突变体G2385R和P755L以及GBA基因L483P突变体均注释为可疑致病性(DM?);在HGMD数据库,GBA基因L483P突变体和PINK1基因突变体R407Q注释为致病性(DM),LRRK2基因突变体G2385R注释为疾病相关多态性与其他功能证据(Disease-associated polymorphism with additional functional evidence,DFP),而LRRK2基因突变体P755L注释为疾病相关多态性(Disease-associated polymorphism,DP)。TRPM7基因移码突变Y1113Lfs*12在几个数据库中均未找到相关致病性注释。结论本研究首次在PD患者中发现TRPM7基因c.3337dup T:p.Y1113Lfs*12移码突变,可能对于解释PD致病有遗传学效应。本研究还证实了LRRK2基因c.7153G>A:p.G2385R在亚洲人群PD致病中的意义。此外,本研究还为探索PINK1、DNAJC13、GBA、LRRK2、SNCA基因突变与PD致病之间的关系提供生物信息学基础。
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