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乙酰胆碱酯酶（AChE）是有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的作用靶标。为了阐明AChE在书虱抗性中的作用和地位,以及AChE介导的抗性机理。本论文以重要的储粮害虫嗜卷书虱（Liposcelis bostrychophila Badonnel）为对象,从AChE的生化特性以及基因克隆两个方面对其进行研究。 首先,对嗜卷书虱敏感品系以及2个抗性品系（DDVP抗性品系RDDVP,RF=10.2105和PH3抗性品系RPH3,RF=4.5083）AChE的生物化学性质进行了较为系统的研究。比较发现嗜卷书虱RDDVP品系和RPH3品系的酶原蛋白含量均显著高于敏感品系（P<0.05）,两个抗性品系间也存在着显著差异（P<0.05）。RDDVP和RPH3品系AChE的活力和比活力都明显低于敏感品系,且差异均达到了显著水平（P<0.05）。RDDVP品系的Km值较敏感品系显著升高（P<0.05）,是敏感品系的1.33倍,说明与底物的亲和能力显著降低,酶发生了质的变化,而RPH3品系无显著变化。从Vmax看,RDDVP无明显变化,而RPH3却显著降低（P<0.05）。从有机磷杀虫剂DDVP对嗜卷书虱不同品系AChE的双分子反应速率常数Ki真值比较可以看出,两个抗性品系AChE对DDVP的敏感度相对敏感品系均显著降低（P<0.05）。以上研究结果表明,两个抗药性品系都存在靶标抗性,其抗性的形成与AChE结构的变化有一定的相关性。由于AChE结构发生了改变,导致抗性品系AChE对底物的亲和力降低,而且对有机磷杀虫剂DDVP的敏感度亦显著降低。 其次,从分子水平进一步对嗜卷书虱的AChE进行研究,以期揭示AChE介导抗性的分子机制。根据已知昆虫（蜱螨）AChE氨基酸保守序列设计合成适用于嗜卷书虱AChE基因扩增的引物,采用RT-PCR及克隆等分子技术获得了嗜卷书虱AChE的2个cDNA片段,分别为:156bp（GenBank accession number:AY762053）和264bp（GenBank accession number:AY762052）。这2个cDNA片段推导的氨基酸序列为:EMWNPNTNISEDCLYLNIWVPQRVRLRHHGGSQQDERRPHKVPMLIWIYGGGFYSGTATLDVYDPKTLVSEEKVIVASMQYRIASLGFLFFDTPDVPGNAGLFDQLMALQWVHDNIHAFGGNPHNVTLFGESAG,共134个氨基酸,该序列与棉蚜ACHE2（Aphis gossypii,AF502082）和麦二叉蚜（Schizaphis graminum,AF321574）的AChE同源性最高,达75%;其次为马铃薯叶甲（Leptinotarsa decemlineata,L41180）64%;尖音库蚊ACHE1（Culex pipiens,Q86GC8）63%;黑尾叶蝉（Nephotettix cincticeps,AF145235）62%;棉铃虫（Helicoverpa armigera,AF369793）、冈比亚按蚊AChE1（Anophelesgambiae,AJ488492）和小菜蛾（Plutell axylostella,AY061975）为61%;埃及伊蚊（Aedes aegypti,Q9TX11）59%:三带喙库蚊（C.tritaeniorhynchus,AB122151）和斯氏按蚊（A.stephensi,P56161）为58%;黑腹果蝇（Drosophila melanogaster,X05893）56%;电鳐（Torpedo californica,X03439）、橄榄大实蝇（Bactrocera oleae,AF452052）、家蝇（Musca domestica,AF281161）和铜绿蝇（Lucilia cuprina,U88631）为55%,桃蚜（Myzus persicae,AF287291）54%,棉