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自1957年美国太平洋酵母公司生产出第一个苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis，Bt)商品制剂以来，Bt杀虫剂作为一种对人畜安全、无环境污染、产量高、效果好的微生物杀虫剂，在农、林及卫生害虫的防治中发挥了重要作用，成为国内外开发应用最成功的一种生物农药。但随着它的广泛使用和多种转Bt基因植物的推广，害虫已经对Bt产生了明显的抗药性，因此如何治理好昆虫对Bt的抗性已成为害虫防治中的重要问题。只有弄清楚昆虫抗性形成的分子机制，才能制定出合理的抗性管理策略，延缓抗性的产生。本实验室的前期工作已经证明了粉纹夜蛾离体培养的细胞能够对Bt杀虫晶体蛋白Cry1Ac产生一定水平的抗性，而且细胞系对Bt抗性特点与虫体的类似。因此本实验采用了对Bt Cry1Ac毒素十分敏感的BT1-TN-5B1细胞和同源的抗性细胞为实验材料，利用Cry1Ac毒素蛋白，经过连续的，高强度的抗性筛选，采用双向凝胶电泳和质谱联用技术，从蛋白质水平上来揭示两种细胞的差异。通过双向电泳技术，得到了粉纹夜蛾对Bt Cry1Ac抗性细胞和敏感细胞的总蛋白质电泳图谱，以ImageMaster Elite 5.0v软件来分析，发现Cry1Ac抗性细胞的总蛋白质点平均为896个，敏感细胞的总蛋白质点平均为838个。大部分蛋白分布在14-100KD之间，大部分蛋白的pI主要在4-9之间，酸性段和碱性段基本上没有分离到蛋白质点。挖取了细胞总蛋白图谱中几个重复性良好的蛋白质点，将这些点进行了肽质指纹图谱鉴定，通过通过Mascot检索蛋白质数据库，找到了几个可能与其有同源性的蛋白质，通过计算机软件的分析，在分值上和肽段的覆盖率上最为接近的一个蛋白质A为变形菌门γ-变形菌纲Idiomarina loihiensis L2TR的鞭毛驱动蛋白(flagellar motor protein)，它与细菌质膜上的蛋白具有一定程度的同源性。表明该蛋白质可能是一种与细胞膜蛋白相似的蛋白。另外，对该点PMF的肽段分析发现该蛋白的1—44肽段与DNA甲酰氨基嘧啶—糖基化酶的肽段序列是完全匹配的，但要对其做出鉴定还需要进行N端测序来完成。蛋白质点B则没有找到与其匹配率较高的蛋白质。蛋白质点C则是与脂多糖生物合成蛋白具一定的同源性的蛋白质。这些蛋白可能与抗性的产生有直接或间接的关系。