家蚕蛹油降解细菌的分离、鉴定及降解能力测定

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利用平板稀释培养法对缫丝废水处理池中的细菌进行了分离,通过紫外分光光度法对其降解家蚕蛹油的能力进行了测定。采用细菌基因组重复序列PCR技术(rep-PCR),对家蚕蛹油降解细菌进行了聚类分析。采用菌落形态、生理生化特征和16S rDNA序列同源性分析对家蚕蛹油降解细菌进行了鉴定。选用Shannom-Wiener指数(H’)、丰富度指数(S)、Pielou均匀度指数(J)和Simpson优势度指数(D),对家蚕蛹油降解细菌的生物多样性进行了分析。主要结果如下。从缫丝废水处理池中共分离得到57个对家蚕蛹油具有降解能力的细菌分离物。降解能力超过50%的细菌分离物有12个,其中H73、H23、H1、H5和H43在72h内对家蚕蛹油的降解率分别达到76.36%、62.04%、60.58%、53.85%和51.20%。家蚕蛹油降解细菌rep-PCR基因指纹分析图显示,57个家蚕蛹油降解细菌被分为44个聚类群。细菌鉴定结果表明,44个聚类群中的39个聚类群属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.),1个聚类群为微杆菌属(Microbacterium sp.),2个聚类群为肠杆菌属(Enterobacter sp.),另外2个聚类群尚未获得其16S rDNA序列,有待进一步鉴定。各菌株的16S rDNA序列已在GenBank上注册。其中,芽孢杆菌属的细菌数量为1.4473×106CFU/mL,大大高于肠杆菌属和微杆菌属的细菌数量,为家蚕蛹油降解细菌中的优势菌群。多样性分析结果表明,芽孢杆菌属的多样性指数、丰富度指数、均匀度指数和优势度指数都高于其他两个属的细菌。
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