化妆品添加剂与外包装增塑剂对青海弧菌的联合毒性及机理

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随着化妆品的普遍使用,越来越多的化妆品添加剂(ADDs)和化妆品外包装增塑剂(PLAs)进入环境中,形成复杂混合污染物,给环境带来的风险也逐渐显露。因此,以5种ADDs(尼泊金甲酯(MET)、尼泊金乙酯(ETH)、尼泊金丙酯(PRO)、丁基羟基茴香醚(BHA)、水杨酸(SAL))和3种PLAs(双酚A(BPA)、双酚S(BPS)、三丁氧基乙基磷酸酯(TBEP))为研究对象,以青海弧菌(Q67)为指示生物,采用直接均分射线法(Equ Ray)和均匀设计射线法(UD-Ray)分别设计ADDs和PLAs的二元和多元混合物,应用时间微板毒性分析法(t-MTA)系统分析了5种ADDs和3种PLAs及其简单和复杂混合物在不同暴露时间点(0.25、2、4、8和12 h)的毒性特点。应用浓度加和(CA)模型分析混合物毒性相互作用,采用绝对残差(d CA)模型定量评估毒性相互作用的强度,并通过扫描电镜等细胞分析技术探讨5种ADDs和3种PLAs及其代表性混合物对Q67的毒性作用机理。实验研究所得到的主要结论如下:(1)5种ADDs和3种PLAs对Q67的毒性均呈现出良好的浓度-效应关系和明显的急性毒性。5种ADDs对Q67毒性的时间依赖性不明显,而3种PLAs具有明显的时间依赖毒性,但随暴露延长毒性减弱。不同暴露时间,5种ADDs和3种PLAs的毒性强弱顺序不同。(2)5种ADDs的26个二元及多元混合物体系(共132条射线)对Q67具有明显的急性毒性,且混合物体系的浓度比和时间依赖毒性具有一定的差异性。5种ADDs的二元和多元混合物体系的相互作用主要表现为拮抗和协同作用,且呈现相似的相互作用变化规律:协同/拮抗作用强度随混合物浓度的增大而呈现先增后减的趋势,但与暴露时间呈正相关关系,且主要集中出现在较长暴露时间下(4~12 h)和中高浓度区域(MET-ETH混合体系除外),各混合物射线的最大拮抗作用在20%~40%之间,最大协同作用在10%~30%之间。(3)3种PLAs的4个二元及多元混合物体系(共20条射线)对Q67的毒性较明显,但四个混合物体系的浓度比和时间依赖毒性有所不同。PLAs的二元及三元混合物主要表现为拮抗和协同作用,除BPS-TBEP混合体系R1~R3射线的拮抗作用强度与暴露时间呈负相关外,其余3种PLAs的二元及多元混合物的相互作用强度呈现相似的变化规律,即随着混合物浓度的增大而先增后减,随着暴露时间的延长而不断增强,且最大拮抗作用强度出现在BPS-TBEP混合体系中,而最大协同作用出现在BPA-BPS混合物体系中。(4)ADDs与PLAs的八元(复杂)混合物体系对Q67具有明显的急性毒性和时间依赖毒性,其相互作用主要表现为拮抗/弱协同作用,且拮抗/弱协同作用强度受暴露时间和混合物浓度的影响,暴露时间相同时,拮抗作用/弱协同强度随混合物浓度的增大而先增强后减弱,在同一浓度作用下,拮抗/弱协同作用强度与暴露时间呈现正相关,八元混合物的U4射线在12 h时的拮抗作用强度最大,且最大拮抗作用强度为60%;弱协同作用则出现在U10射线中,在暴露时间为2 h时,最大协同作用强度为3%。(5)ADDs与PLAs及其混合物均会损坏Q67正常的细胞结构,Q67细胞出现外部形状破裂,细胞结构间界限变得不清晰,细胞间出现粘连现象,部分菌体细胞间出现相互融合,细胞膜变得不平滑,不能维持正常的形状;药物还会导致核酸与可溶性蛋白的大分子流出,培养液中核酸和可溶性蛋白质大分子含量会比对照组增加。
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