活化蛋白C对大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤的保护作用

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目的通过建立大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤模型和大鼠尾静脉注射活化蛋白C(Activated Protein C,APC),探讨大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤过程中炎症变化情况以及APC对大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤的影响,为脂肪肝缺血再灌注损伤的临床治疗和研究提供一种新的思路。方法清洁级健康雄性wistar大鼠60只,通过美国Teklad实验室缺乏胆碱和蛋氨酸饲料(Methionine Choline Deficient Diet, MCDD)喂养,喂养3周制备成中度脂肪肝模型后,将60只wistar大鼠随机均等分为假手术组(Sham组)、对照组(Control组)和实验组(APC组),每组20只。Sham只接受麻醉和肝门解剖,不进行肝门阻断,APC组行部分肝缺血50min再灌注,在再灌注前15min尾静脉注射APC,Control组行部分肝缺血50min再灌注,在再灌注前15min尾静脉注射生理盐水。各组于再灌注6h和24h两个时间点,分别将10只大鼠取材,观察各组血清谷丙转氨酶(Alanine Transarninase, ALT)、谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α)、肝组织髓过氧化物酶(Myeloperoxidase, MPO)含量,肝组织粘附分子1(Intercellular adhesionmolecule-1, ICAM-1)免疫组化染色和肝脏组织病理学改变等指标。所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行统计学分析。结果APC组与Control组的ALT、AST、TNF-α、MPO和ICAM-1表达在各个时间点上均明显高于Sham组。在再灌注6h后,与Control组相比,APC组ALT和AST水平,TNF-α水平和MPO含量明显降低,ICAM-1的表达减弱。光镜下观察肝形态学变化,可见Control组损伤甚为明显,APC组和Sham组损伤程度较Control组轻,Sham组更轻。再灌注24h后,除与Control组相比,APC组TNF-α水平明显降低之外,APC组与Control组各项指标间无统计学差异。结论APC通过抗炎和减少内皮细胞损伤,对大鼠脂肪肝缺血再灌注损伤起保护作用。
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