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目的 通过观察含羟基喜树碱的化疗方案(HCF)对乳腺髓样癌Bcap-37细胞株凋亡及相关基因bcl-2/bax表达的影响,从细胞水平及基因水平评价含羟基喜树碱的化疗方案对乳腺癌的化疗疗效,为建立和推广乳腺癌新的综合治疗模式提供可靠的实验室理论依据;寻找有预测价值的、能够评价各种化疗方案对乳腺癌疗效的肿瘤细胞学参数,以助于临床根据病人不同的生物学表型来设计个体化的治疗方案,最终提高乳腺癌的远期生存率,特别是延长无瘤生存的时间。 实验方法 实验对象:人乳腺髓样癌Bcap-37细胞株 实验组:HCF方案,即:羟基喜树碱(HCPT)、环磷酰胺(CTX)、氟脲嘧啶(5-Fu)。设3种浓度:HCPT0.005mg/ml、CTX 0.1mg/ml、5-Fu 0.2mg/ml为最高浓度,其他2个浓度为该浓度稀释2.5倍、10倍,分别称高、中、低浓度。 对照组1:CAF方案,即:CTX、阿霉素(ADM)、5-Fu。设3种浓度,最高浓度:ADM 0.005mg/ml、CTX0.1mg/ml、5-Fu 0.2mg/ml、浓度稀释倍数同上。 对照组2:CMF方案,即:CTX、氨甲喋呤(MTX)、5-Fu。设3种浓度:最高浓度:MTX 0.01mg/ml;CTX0.1mg/ml;5-Fu 0.2mg/ml,浓度稀释倍数同上。 对照组3:空白对照,不施以任何处理因素。 — — 以上各组药物的不同浓度分别作用于乳腺髓样癌细 胞株24J时。氏 赔胭细胞,分别进行:流式细胞仪检测凋亡指 数(AI人 免疫组化测定凋亡相关基因b毛 表达水 平、HE染色观察乳腺癌凋亡细胞形态。 结果 HCF组的细胞凋亡指数(AI)明显高于 CAF、CMF 组,0M.05入 **F组细胞的bC卜2表达率在各个浓度 水乎上均明显低于CMF及CAF’组0叨.05人 在各组内 部表现为随着药物浓度的增高,bclZ表达逐渐降低;bax甲 表达在3个浓度水下卜厂、呵刀扣为高干可厂F绢 们羊异 不显著;而CMF组和HCF组3个浓度水平上的加x表 达均高于**F组,差异显著:在各药物组内部,均表现 出随着浓度的增高,bax表达逐渐升高0卅.05\ 细胞 死亡率在高浓度水平上CAF组比HCF组高,有显著性 差异:但在中、低两个浓度上的差异并无显著性;而**F 组在低、中两个浓度水平上的细胞死亡率高于CMF组 0栅.05人 在高浓度水平上两者差异无显著性。各药物@组内部均表现出随着浓度的增高,细胞死亡率逐渐升高. CAF组3个浓度水平之间的细胞死亡率差异有显著性 0m.05人 而在HCF组和CMF组各内部则表现为中 浓度与低浓度的差异无显著性,高浓度的细胞死亡率则 显著高于中浓度和低浓度呼m.05人 结论 1.HCF方案可以诱导乳腺髓样癌Bcap上7细胞株 凋亡,其凋亡率显著高于CAF方案及CMF方案。 2.HCF方案可以诱导乳腺髓样癌Bcap37细胞株 的M毛基因(抑制凋亡基因)表达下调,诱导bax基因 (促凋亡基因)表达上调。 第3 页 延边大学医学院硕土论文 一 3.HCF方案对乳腺髓样癌BcaP上7细胞株的杀伤-效应与传统化疗方案 CAF相同、优于 CMF方案。威——’——-.’二_-二一二二.二.._。_,。。_____.。