黄姑鱼(Nibea albiflora)是我国重要的海水养殖鱼类,具有生长快、适应性广,抗逆性强等优点。在养殖中黄姑鱼的雌鱼比雄鱼生长快,因此研究黄姑鱼的性别控制及其性别决定机制,对于培育全雌黄姑鱼新品种具有重要意义。本研究优化了黄姑鱼伪雄鱼的诱导方法,同时利用转录组测序技术分析了其性别决定相关的基因,研究结果如下:1.通过投喂不同剂量的来曲唑(10/100 mg/kg)以及17α-甲基睾酮(MT,10 mg/kg)来诱导雌核发育黄姑鱼发生性逆转。实验设置了正常黄姑鱼和雌核发育黄姑鱼为对照组,分析不同处理组的生长性能、性比、性腺组织学结构等,进而筛选和优化诱导伪雄鱼的适宜方法。结果表明来曲唑(10/100 mg/kg)可以成功诱导雌核发育黄姑鱼100%逆转为表型雄鱼,同时还有促进精子生成的作用,但在处理期间对黄姑鱼的生长有轻微的抑制作用。经组织切片观察发现使用来曲唑诱导后的性腺均具有正常的精巢结构,发育良好,且在诱导处理结束后仍旧保持其正常精巢结构,但是MT组具有一定比例的异常发育性腺,部分精巢内出现空泡化等毒理现象。此外,在150日龄及210日龄(处理结束)的性腺成熟指数也显示处理组与对照组之间并无显著差异。2.采集伪雄,雌核发育以及正常雌雄黄姑鱼的脑和性腺组织共26个样品,进行转录组测序,平均每个样品质控之后产出6.41Gb数据,共检测到表达的基因数为58282,其中已知基因为56964个,预测的新基因为1318个。差异基因表达分析显示正常雌鱼性腺与伪雄鱼性腺中的差异基因最多,高达8958个基因;正常雌雄的脑中差异基因数目最少,仅有30个。分析雌核发育,伪雄鱼以及正常雌雄黄姑鱼的脑及性腺的转录图谱,发现雌核发育与正常雌鱼的卵巢中基因表达水平一致,伪雄鱼与正常雄鱼精巢中一致,而四种鱼的脑的基因表达水平基本一致。通过GO功能注释分析,脑组织中差异基因主要富集在生物过程的调节以及催化活性等条目,性腺则富集到生殖相关的条目。性腺中的差异基因还进一步通过KEGG注释富集到p53和PPAR信号通路。3.从已知基因挑选出cyp19a、zp3、zp4、foxl2等雌性相关表达基因,dmrt1、gsdf、amh、ar等雄性相关表达的基因以及dnd和vasa两个生殖基因,通过qRT-PCR验证了转录组结果的可靠性。对cyp19a、dmrt1、foxl2、vasa四个基因在正常黄姑鱼组织中的特异性表达进行检测,发现cyp19a仅在卵巢中表达;而dmrt1仅在精巢中表达;foxl2在鳃和性腺中都有表达;vasa作为生殖基因仅在性腺中表达。