【摘 要】
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本文旨在明确白藜芦醇对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)氧化应激与增殖的作用及分子机制.体外分离培养原代大鼠PASMCs,采用不同
【机 构】
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四川大学华西医院/华西临床医学院呼吸病学研究室,成都610041;四川省肿瘤医院重症医学科,成都610041;电子科技大学中国科学院四川转化医学研究医院,成都610054
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本文旨在明确白藜芦醇对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)氧化应激与增殖的作用及分子机制.体外分离培养原代大鼠PASMCs,采用不同浓度的白藜芦醇(10、20和40 μmol/L)或NADPH氧化酶(NADPH oxidases,NOXs)抑制剂VAS2870 (10 μmol/L)预处理0.5 h,然后将细胞置于常氧(21％ O2,5％ CO2)或低氧(2％ O2,5％CO9中培养24 h.采用CCK-8法和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平检测细胞增殖,用DCFH-DA测定细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的生成,用real-time RT-PCR和Western blot检测NOX1、NOX4和低氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)的表达水平,通过小干扰RNAs (small interference RNAs,siRNAs)特异性沉默Hif-1α和Nox4后确定相关信号通路.结果 显示,白藜芦醇和VAS2870均能显著抑制低氧诱导的大鼠PASMCs细胞增殖和ROS生成,同时白藜芦醇还能有效阻止低氧诱导的HIF-1α蛋白的聚集和NOX4的表达上调,而对NOX1没有明显的影响.沉默Hif-1α或Nox4后,低氧诱导的大鼠PASMCs细胞增殖和ROS累积均显著降低,且能被白藜芦醇进一步抑制.上述结果提示,白藜芦醇可能通过阻断HIF-1α/NOX4/ROS信号通路抑制低氧诱导的大鼠PASMCs氧化应激和增殖.
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